【求助】请问质谱数据如果分析、搜索、处理?


分离纯化了一个未知的蛋白质,交给外面的公司做了酶切和MALDI-TOF,返回来一些数据,想自己先分析一下,实验室没有人做过这方面的。请问如何分析搜索?去哪个数据库和网站?谢谢。

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最新回复

  • xingyi08 (2014-3-23 22:56:26)

    我想请问一下你是怎么分离纯化的?最近我是通过2-D找未知蛋白,但是结果一直不好,想看一下还有没有其他的方法,先谢谢了
  • 流星锤 (2014-3-23 22:56:47)

    过柱纯化啊,离子-疏水-离子-凝胶层析
  • remonte (2014-3-23 22:57:14)


    用Mascot就可以了
  • uaubc (2014-3-23 22:57:39)


    请问你在哪个公司做的质谱?价格怎么样?
  • bluelake (2014-3-23 22:58:07)

    我想通过2-DE找差异表达的蛋白质,然后对其纯化,是苹果叶片蛋白质,一直不知道用什么方法纯化特异蛋白质好;另外,请公司作抗体的话,到底需要多少纯化的蛋白质(单克隆抗体和多克隆抗体各需蛋白多少)?
  • Ao7 (2014-3-23 22:58:54)

    质谱结果出来后,它会给你一个报告单,里面是一些质子数吧(MS),然后你将这些数据上传到cuturl('http://www.proteomics.com.cn/')这个网站的mascot或者直接搜索mascot,到它的主页上就可,把你的数据上传后,他会给你一个分析说明,里面说明是什么蛋白的,可能性有多大,哪些质子数对应,哪些没有。
  • jiushikeshui371 (2014-3-23 22:59:15)


    大家好,我们课题中要用到DIEG技术,血清蛋白质组学方面的,
    不过我们学校目前做不了,要送到外面做,
    我想请教下哪些实验室或者公司可以对外服务啊,
    最好有联系电话和联系人,
    谢谢啦!
    标本已经收集好了,如果质量上乘、价格合理,应该很快就能做了。
  • yes4 (2014-3-23 22:59:37)


    相关疾病:
    电击伤
    验证MALDI-TOF质谱鉴定结果
    进入cuturl('http://www.expasy.org/') 网站,
    在Databases下点击UniProt Knowledgebase ,
    在新窗口右上点击Proteomics tools,
    在Protein identification and characterization 下点击Mascot,
    接下来选择Peptide Mass Fingerprint进入 MASCOT Peptide Mass Fingerprint 填表界面。
    主要填表项说明:
    Email 必填
    Database 一般选SwissProt
    Taxonomy 根据你的样品来源选择
    Enzyme 选Trypsin
    Allow up to 选1个错切
    Fixed modifications 选Carbamidomethyl (C)
    Variable modifications 选Oxidation (M)
    Peptide tol 选0.2 Da
    Mass values 选MH+
    Monoisotopic 为默认
    然后导入质谱分析结果包含Mass list 数据的文件,或在Query栏中手工输入蛋白的Mass list 数值,最后点击Start Search...
  • PPT (2014-3-23 22:59:55)


    lz只做了一级么?
    用pmf搜库的可信程度......应该不高吧
  • 流星锤 (2014-3-23 23:00:18)

    QUOTE:

    原帖由 PPT 于 2014-3-23 22:59 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

    lz只做了一级么?
    用pmf搜库的可信程度......应该不高吧
    我只做了一级,现在搜出来的结果都很不理想,都不能确定我的蛋白。
    做esi-q-tof可以确定吗?
  • shanzhapia696 (2014-3-23 23:00:44)


    我做过这方面的实验
    你得到的数据还是质谱图?
    如果是数据的话,应该就可以进行网上检索了,进上面所说的网站,输入各项具体参数,然后就可以得到对应的蛋白的名称
    如果是质谱图,就要先用DATA Explore 这个软件把图进行处理,根据内标外标的设定来减小误差,得到一组数据,然后的步骤同上
  • mogu (2014-3-23 23:01:51)


    如果是二级质谱图的话,应该用MS/MS ion search搜吧!不过好像只能导入质谱文件搜索的。