【求助】扫描电镜下观察分析是否出现淍亡小体

最新回复

• yuanyuan (2015-1-31 20:01:07)

  应该是用扫描电镜，这个我做过。首先你应该选用24孔板，然后把一个大约边长1厘米的盖玻片（自己用剪刀剪的）保证无菌，放入24孔板的底部，然后把细胞点入培养板，培养过夜，让细胞帖壁于小盖玻片上，然后加药，按照你需要的处置时间，培养48小时，或者是72小时，然后用镊子把小盖玻片拿出来，用固定液固定梯度脱水，染色。最后由电镜专业操作人员在扫描电镜下观察。可以帮你分析是否出现淍亡小体，淍亡小泡等。

• wwwh (2015-1-31 20:01:38)

  对楼上zhaowei0826 的答复我不敢苟同,我认为应该用透射电镜看凋亡小体的.扫描电镜只能看细胞的表面形态,无法看到细胞核,所以不可能用其来观察细胞凋亡.

• 大花猫bb (2015-1-31 20:02:07)

  收集离心培养的细胞,4%戊二醛固定.如果你们不需要自己动手处理样品,交给专门的技术人员就可以

• efp (2015-1-31 20:02:38)

  我在我们学校电镜室呆了一年了快。应用电镜做凋亡这一块做的也挺多的，其实扫描，透射电镜都可以拿来做凋亡的指标的。
  扫描电镜是只能看到表面结构但同样可以显示出凋亡，如可以观察到：细胞膜表面可见细胞表面泡状突起的形成，微绒毛消失或基本消失，并可见分离出的凋亡小体。而透射电镜下可以观察到：细胞体积缩小，微绒毛消失，核固缩，染色质浓集靠近于核膜，并沿核膜收缩，可见具有完整膜性结构的凋亡小体的分离。

• 妮子@ (2015-1-31 20:03:12)

  哦？我也在我们学校电镜室呆了一年了，扫描电镜看凋亡怎么没看到过啊？也可以吗？好象各种参考书上对凋亡检测手段上面没提到么，可能是我们孤陋寡闻啊

• aaby (2015-1-31 20:03:46)

  细胞凋亡是一个过程，先用比较简单和省钱的办法确定凋亡的时间，只有后期形成凋亡小体时，做电镜才能看到典型的凋亡。扫描透射电镜都可以证实凋亡，但是不要忘了，培养细胞中总有1～10％左右的自发凋亡，所以专家会置疑，一般比较公认的是透射电镜的证据。在发文章或作报告时，除了提供形态证据外，一定要有其他证据例如分子生物学或生化证据，特别是DNA梯子。以及相关酶原激活的细胞原位免疫荧光image等。凋亡的类型很多，做前查一下是属于那种。如果不要过程，只要结果，就只作后期凋亡的形态证明好了。