【求助】做固相萃取,但是总是出现问题

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【求助】做固相萃取,但是总是出现问题
最近刚开始做固相萃取,但是总是出现问题,所以上来请求大家的帮助
我的药物是喹诺酮类,使用c18的固相小柱。我用1ug/ml的药物水溶液上样,使用水,5%甲醇,20%甲醇1%磷酸依次淋洗,最后使用5%氨水95%甲醇洗脱。
但是我最终洗脱出来的液体会有分层,若是涡旋,或是搅拌一下,就会有结晶出现。我相信这不是药物的结晶。而这样,药物就无法被检测出来了。这是为什么呢?
希望各位高手指点。有什么解决的办法?还是要在淋洗或洗脱方案进行怎么样的改进?
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最新回复

  • xgy412 (2016-4-08 11:49:23)

    请问,您用水,5%甲醇,20%甲醇,1%磷酸依次淋洗的时候,洗脱液有分次洗涤吗?是上述洗脱液有分层,斡旋?还是5%氨水95%甲醇洗脱液有分层,斡旋?你的问题没有说清楚!谢谢
  • malong (2016-4-08 11:49:47)

    我也想用固相萃取小柱,做血液样品.是不是必须用固相萃取仪啊?得多少钱啊?固相萃取仪是提供低压的吗?
  • 8899 (2016-4-08 11:50:05)

    我也想用固相萃取小柱,做血液样品.是不是必须用固相萃取仪啊?得多少钱啊?固相萃取仪是提供低压的吗?
    不一定要用固相萃取小柱,可以用有机试剂沉淀蛋白法处理样品,固相萃取小柱比较贵,c18的是最便宜的,waters的挺好单价较高,可以买Alltech的比较便宜,质量也还可以。
  • daomei (2016-4-08 11:50:25)

    我是最后一步洗脱的时候,发现有分层现象
  • malong (2016-4-08 11:50:50)

    洗脱前用水再淋洗一次并抽干水,再洗脱应该就不会有分层了
  • xgy412 (2016-4-08 11:51:15)

    不知你在用固相小柱前是否对其进行活化,应该注意对固相小柱的活化,可能对你的实验结果有影响。
  • efp (2016-4-08 11:51:46)

    不知你在用固相小柱前是否对其进行活化,应该注意对固相小柱的活化,可能对你的实验结果有影响。
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