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New Objective纳分离喷雾的原理及特点

2014.5.15

  电喷雾离子化质谱法(ESI-MS)是在带电液滴气溶胶上施加高电压产生离子的技术。传统来说,市场上的ESI质谱仪使用的流速范围在10 µL/min-1 mL/min 。New Objective研发出了更多色谱柱和纳喷雾针新产品,包括将纳流柱和ESI电喷针组合的PicoFrit色谱柱。为了能使纳喷雾的工作效率和重现性最优化,开发了PicoView 纳喷雾离子源,配合PicoTip电喷针和PicoFrit色谱柱的使用。数字化PicoView改善了用户的控制性和灵活性,使用户在灵敏度和实验方法上达到一个更高的层次。最近New Objective推出了全新设计的纳喷雾产品PicoChip。在积累了超过十五年的纳喷雾产品的研发生产,并在综合顾客意见的基础上,PicoChip表现出以帮助客户科研为目标的理念,提供了纳喷雾产品前所未有的高灵敏度、高分离度、易操作性。

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  电喷雾原理

  对于大多数分析物来说,ESI-MS基本是浓度型检测器,其信号响应与流动相中分析物浓度呈函数关系,而响应强度或灵敏度和待测物的可电离数量有关。传统的LC-MS方法,一般使用内径4.6mm的色谱柱,大于0.5 mL/min流速。为了适应高流速,ESI源普遍通过气压辅助喷雾产生气溶胶。直接将传统柱与ESI源连接的局限在于,高流速下的气化电喷雾离子化效率很低,通常只有0.1%或更低,绝大部分样品被浪费,因为没有用于产生供检测的离子流。

  为了更多地利用样品,应降低柱子出口流动相的体积或降低流速。流速的降低能改善分析物的浓度响应,提高信号的信噪比,因而提高待测物的检测灵敏度。纳流质谱方法是在低流速下(nL/min)的电喷雾和样品分子离子化,联合窄内径色谱柱,如75µm内径纳流柱,250 nL/min 的工作流速,与常规4.6mm内径的色谱柱相比,其质谱检测器响应具有更高的信噪比,理论上大约3000倍而实际应用普遍超过500倍灵敏度的提高。在样品量受到严重限制的情况下,比如通过胶带电泳分离得到的蛋白质,消耗最少的样品,得到最好的结果是所期盼的。采用75 um内径的纳分离柱,可以容易的达到低飞摩尔(10-15fmol)甚至埃摩尔 (10-18amol)范围的蛋白检出量。

  纳电喷雾的特征

  电喷雾质谱(ESI-MS)是在气溶胶上施加高电压使液滴带电产生离子的技术。传统来说,ESI-MS使用的流速范围在10 µL/min-1 mL/min。由于流出喷针的液体体积相对较大,气溶胶形成必须依靠气动雾化和加热去除溶剂,以得到稳定的喷雾,特别是对高水相含量的液体。当流速降低到nL/min 时,液滴形成就很容易了,只需施加高电压就可产生喷雾,无需鞘气和外部热源。对水或含盐的流动相,低流速有利于稳定喷雾和改善信号质量。nL/min流速下的电喷雾普遍被认为是“纳喷雾”,它已成为一种通用方法用于蛋白质质谱分析。低流速ESI适用于宽组成液体成分,例如对“纯”水的稳定喷雾。低流速ESI促进了离子化效率,因为通过喷针的液体更少,产生更小的气溶胶液滴。低流速ESI允许更长的分析时间,为高端质谱仪的扫描提供足够的时间,从而获得结构信息。将纳喷雾与纳流分离色谱结合,可消除使用鞘液或辅助液引起的信号降低。对常规mL/min流速的ESI-MS 实验无法得到的方法检出限,可尝试通过纳喷雾来改进。

  了解更多关于纳电喷雾的相关理论信息,请点击:http://www.newobjective.com.cn/electrospray/

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