【求助】请问复性过程中测OD600有什么含义？

最新回复

• 831226 (2014-4-16 16:07:39)

  
  细菌数量不同，菌液的光密度值会有所变化，通过OD600值的变化主要是来反映细菌的数量。
  OD600为0.5时，每ml菌液中细菌数为100000000个。

• rxcc33 (2014-4-16 16:08:03)

  
  在研究复性过程的影响因素时，横坐标是影响因素，纵坐标是复性液OD600的值，请问这能表征什么？是什么原理？

• 831226 (2014-4-16 16:08:22)

  
  是什么复性啊？能不能把文献传上来啊？

• 831226 (2014-4-16 16:08:42)

  
  可能是此包涵体在600nm处有最大吸收，当OD600值增大时包涵体量比较多，还没有复性。而当OD600值减少，则表明包涵体大部分已经复性。从而通过测定OD600值来判断包涵体的复性情况。但是为什么会是在600nm处有最大吸收峰我也没有搞清楚。

• rxcc33 (2014-4-16 16:09:01)

  看了看是不是这么回事啊，OD600测定的是复性过程中蛋白析出情况。蛋白析出后就像菌体一样对OD600有吸收了，OD600高说明复性时析出的蛋白沉淀多，蛋白沉淀一般都是复性不成功的蛋白（也有可能是复性成功后聚集的）。作者用这个来衡量复性过程我感觉是不太严谨的，因为没有表明复性结束后的可溶性蛋白是有活性的，即使蛋白析出的少，不代表复性成功的多啊，可溶的都是复性成功的？不见得吧。我觉得应该是复性结束后测活比较有说服力一些。

• rxcc33 (2014-4-16 16:09:19)

  
  谢谢各位战友的解答。
  那么请问复性效率要怎么表示比较确切？
  有看到文献用相对复性率表示的，是怎么计算的？
  还有用非还原性SDS－PAGE表示。
  不知有什么好的建议？

• yonger (2014-4-16 16:09:48)

  
  我感觉这涉及到一个基本概念的问题了，看过一些文献，发现对于复性率的定量似乎都不太准确。什么是包含体？什么是复性呢？这个问题大家都很清楚。那如何衡量复性呢？最准确、
  最合理的方法肯定是测活。至于什么SDS-PAGE及液相的方法只能说明结构上的变化，但无法证明这种变化是不是你所期望的，除非有标准品对照。所以我感觉要是想言而有物的话，可以考虑用测活的方法。