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【求助】补测个拉曼 证明一下金粒子确实是在生物模板上
生物模板上组装了金纳米粒子,审稿意见是让补测个拉曼 证明一下金粒子确实是在生物模板上。于是做了拉曼。【求助】补测个拉曼 证明一下金粒子确实是在生物模板上
在514nm下进行的拉曼 基本上没有峰,而且基线飘移的很凶。怀疑是被荧光干扰,所以换作1064nm做了傅立叶拉曼,就是上传的这个图了。
金纳米粒子的直径在10-20nm之间。
生物分子作为对照 做了个拉曼 还不错,
然后做了一个在生物分子上附着了纳米金粒子的样品的拉曼光谱,峰基本上都没了,这是怎么回事啊?第一次做拉曼,请高手指教,应该怎么做呢?或者应该怎么分析呢?
图如下:(红色的是生物分子本身,黑色的是附着脸纳米金粒子的拉曼)
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最新回复
QQ爱 (2016-2-07 18:57:54)
hcy517 (2016-2-07 18:58:17)
无怨无悔 (2016-2-07 18:58:38)
xgy412 (2016-2-07 18:59:08)
从你的光谱里面,只是看出了Raman的counts确实增强了很多,但是没有观测到你的生物模板的信息。是不是你的激光功率太高了?要不就是你的纳米粒子太多了,以至于完全盖住了你的生物模板。另外,你有没有测量一下UV-vis?你的纳米粒子的吸收峰在多少nm?然后根据这个选择一下别的波长的激光。祝你好运!
wawa11 (2016-2-07 18:59:33)
不过有几个问题,请您赐教:
1.SERS一般不是都需要探针分子的吗?就是一些大的有机分子。不是任何有机物都可以作为SERS的探针分子的吧?
2.测试紫外可见的吸收峰位置在530nm左右,首次做拉曼选择的激光波长为514.5nm,但是非常悲哀的没有任何信息,初步怀疑是荧光所致。图上传如下。
3.1064nm下测试的功率为0.12W,不算太大了吧,装了两次样,结果都如此。
4.还有一个问题想请教:在1064nm下重复实验,液体样品(严格来说是悬浊液)应该怎么制样呢?
再次感谢,金币将在交流结束时一并奉送!
xgy412 (2016-2-07 19:00:02)
xiaoxiaoai (2016-2-07 19:00:27)
1.SERS一般不是都需要探针分子的吗?就是一些大的有机分子。不是任何有机物都可以作为SERS的探针分子的吧?
你说得对,是需要探针分子,但是我个人认为,那是为了证明SERS的存在。比如说可以增强多少倍。使用很灵敏的探针分子, 很稀的浓度。我觉得你的生物分子也可以作为探针分子,只不过就是增强倍数的问题。
2.测试紫外可见的吸收峰位置在530nm左右,首次做拉曼选择的激光波长为514.5nm,但是非常悲哀的没有任何信息,初步怀疑是荧光所致。图上传如下。
看见了,是荧光很强。
3.1064nm下测试的功率为0.12W,不算太大了吧,装了两次样,结果都如此。
这个已经不小了。通常用的是几个mW,你这都已经120mW了。样品估计被烧焦了!不过我不清楚这个波长的激光是不是很大,没有使用过。我使用514和635的激光的时候,都是几个mW,有的时候是0点几个mW。
4.还有一个问题想请教:在1064nm下重复实验,液体样品(严格来说是悬浊液)应该怎么制样呢?
直接测量应该就可以吧,找一个玻璃管装完液体之后封闭,直接测量就行了。或者不用那么麻烦,把溶液装载烧杯或者表面皿里面,使用10x的镜头,不要让镜头接触到液面。
跳跳哈里 (2016-2-07 19:00:55)
另外,为什么不做633呢,正常金都是做633的。但是象楼上所讲,光的能量不能太强,对于生物分子而言,到达样品的能量也就是100微瓦左右,否则会把样品烧掉的,就像你那上面那么大的碳化包。
xiaoxiaoai (2016-2-07 19:01:23)
对于浑浊液体,如果短时间内不会沉积,你可以把样品仓里的样品杆卸了,然后用一块泡沫挖个洞,把比色皿放在里面,光滑的一面朝外,然后移动泡沫手动对焦。白光下头伸进去,看那几个光点什么位置聚在一起就是最佳位置。不知可否,楼主可以试一次,共同学习。
efp (2016-2-07 19:01:48)
8899 (2016-2-07 19:02:17)
然后文章投什么期刊 和审稿人是怎么回事呢?额 云里雾里。。。望明示。
要证明金粒子和生物模板co-location,有什么方法吗?审稿人的意见是这样的:“The claim that the "nanowires" are nucleated by the*** is
not supported by the data. If the *** is a scaffold, the authors need to
demonstrate co-location (perhaps by Raman spectroscopy) of the gold and the ***. ” 望前辈明示 :tuzi28:
双子座 (2016-2-07 19:02:42)
楼主也许不是专门做拉曼的,可能不会知道要用拉曼测生物分子还是有一定难度的。
aaby (2016-2-07 19:03:05)
审稿人的意见是让作出什么呢?理想的效果是什么样子的呢?除了生物分子的峰还应该有什么其他的峰出现呢?不会分析啊。。。。。。
焦急 郁闷中,tian0429可否加为QQ,方便直接交流。我的Q号:594087030
886爱 (2016-2-07 19:03:38)
大花猫bb (2016-2-07 19:04:00)
xiaoxiaojinglin (2016-2-07 19:04:36)
p1900 (2016-2-07 19:05:02)
要看金是否组装在模板上,金上还是要有标记分子才行
是不是能这样,1.不加连接的生物分子,模板上组装带有标记分子的金,冲洗一下,测拉曼,应该是没有标记分子的信号,或很弱
2.加入连接的生物分子,模板上组装带有标记分子的金,冲洗一下,测拉曼,应该是有很强的标记分子的峰
由此说明生物模板上已经组装上金了
今生如此 (2016-2-07 19:05:26)
没有看明白审稿人的意见,回复的时候可以不可以咨询呢?这个回复意见怎么说呢。反正现在实验结果不好,不准备用。
xiaoxiaoai (2016-2-07 19:05:50)
但是你的样品有很大的荧光,那么需要避开荧光,所以要选择能避开荧光
sers效果还比较好的激发波长。另外,样品对激发波长是有选择的,有些
波长很难激发拉曼谱。
【求助】补测个拉曼 证明一下金粒子确实是在生物模板上