关注公众号

关注公众号

手机扫码查看

手机查看

喜欢作者

打赏方式

微信支付微信支付
支付宝支付支付宝支付
×

质谱沙龙第七期活动报道

2008.5.04

2008年4月27日下午,质谱沙龙第七期活动在北京第二炮兵总医院制剂楼举行。这个系列活动已经举办了六期,由二炮总医院、北京师范大学质谱中心和AB公司共同发起和组织,由AB公司赞助,以专题报告和讨论为主,参与者均为从事液质联用工作的一线实验人员,互相交流仪器使用和应用方法的经验和心得。此次到会者除了来自二炮总医院、北京师范大学、军事医学科学院、西苑医院、朝阳医院、北大医学院、北医三院、空军总医院、北京益科生公司、SGS北京公司、AB公司等老朋友外,还有来自中科院药植所的新朋友加盟。分析测试百科网参加了该次活动。三个报告人作了非常有意思的几个报告。

让LC-MS/MS在临床上发挥更大作用

二炮总医院药剂科主任刘丽宏博士作题为《LC-MS/MS技术在医院药学中的应用》的报告,结合自己的工作实例,谈了二炮总医院药剂科使用LC-MS/MS的主要工作,和在临床诊断上发挥的作用。最吸引人的是其中一个临床肝移植的例子,有力地说明了:通过外科医生和药剂科的通力合作,在肝移植方面成功实现个体化给药的突破性探索和临床成果。

前不久,中央电视台十套《科技之光》报道了二炮总医院个体化给药指导下的肝脏活体移植。该例手术是外科医生和药剂科通力合作的成功代表作。从早期诊断时,药剂科就先通过基因测序确定患者属于慢代谢型,由此根据个体差异,制定了良好的给药方案。在术后消除排异反应的用药中,药剂科又利用液质联用技术,成功地、实时监测血药浓度,为合理用药提供了决策依据。至术后15日进实验室检查,各项功能基本恢复,患者平稳出院。而采用传统方案,患者一半需几个月,甚至一年才能恢复。刘主任还介绍了一患者在北京某医院做的肝脏移植手术,尽管手术很成功,但术后排异现象严重,后慕名转院到二炮医院。二炮医院根据其个体性质制定了用药方案,最后患者排异现象很快消除。迄今为止,已有十几例个体化给药病例,均获成功。

轰动的成果来源于科研人员的辛勤努力和探索,也来源于药剂科和临床外科医生的通力合作。

研究背景
 
器官移植已成为挽救终末期脏器功能衰竭患者生命的最有效治疗手段,而术后的抗排斥反应以及存活率是器官移植的最大障碍。在过去20多年里,医药专家一直都在研究和探索临床“个体化给药方式”。
 
由于供体器官和受体器官之间会产生免疫反应,因此器官移植后需要免疫抑制剂来抑制这种免疫反应。FK506(他克莫斯)是一种强效的免疫抑制剂,在临床上主要应用于预防和治疗器官移植后的排异反应。由于不同个体对FK506(他克莫斯)药物的代谢时间长短有差异,普遍存在这样一个问题,有些人是快代谢型,如果剂量不足会导致排斥反应;而有些人是慢代谢型,如果剂量超过而无法及时代谢又会造成许多毒副作用,同样会给并人带来痛苦。好多患者进行肝移植之后,有的要几个月,有的甚至要一年才能正常出院。
 
重大突破
 
二炮总医院药剂主任刘丽宏博士带领科研团队潜心研究,大胆尝试,历经近一年的时间,在两方面获得了重大突破:

一、通过基因检测确定患者的FK506药物代谢类型是快代谢型还是慢代谢型,根据不同代谢类型制定个体化的初步给药方案(主要指用药首剂量和采血时间);

二、建立LC-MS/MS方法检测血药浓度,对患者定时进行血药浓度监测并相应调整给药剂量。有效减少了不良反应或急慢性排斥反应的发生,在真正意义上达到了个体化给药的目的。

《科技之光》报道的这个病例是二炮总医院研究成果的首次临床应用。刘主任也谈到,在当时制定术后给药方案时,她和她的团队也面临较大的压力。FK506是一种进口药,一般医院都是按说明书确定患者的用药量。就这种药来说,西方国家的人种一般都是快代谢型,而东方人种多为慢代谢型,如果仅按照说明书给药,常会产生药物的毒副作用,使术后病人忍受长达几个月的痛苦。按照当时药剂科根据基因型确定的给药方案来看,提示的给药方案比说明书要少1倍以上。如果万一出现失误,将造成排异反应严重等重大后果。但团队本着治病救人的初衷,最终相信科学检测的结果,同时也获得了临床外科医生的大力配合和支持,在给药期间实时监测血药浓度,获得了巨大的成功。

这一先进技术在真正意义上达到了个体化给药的目的,在国内是首创,在国际上也有很大的影响。这一技术突破了器官移植的最大障碍,对器官移植技术在未来的推广和发展有着非常大的推动作用。

在沙龙活动后,其它医院的代表有感而发,目前国内的很多医院,药剂科在临床治疗的技术和决策支持上,都比较无力,因此造成的负面循环就是医院越来越不重视药剂科。而二炮总医院的药剂科为大家树立了一个典范,希望更多的药剂科的科研分析人员,能够向他们学习,用自己的努力和经验,为临床治疗提供先进的技术和决策支持。

中央电视台十套《科技之光》报道

《LC-MS/MS技术在医院药学中的应用》

 

液质联用定性研究中药有效成分的测定方法

来自西苑医院的林力博士做了《液质联用定性研究中药有效成分的测定方法》。中药有效成分的特点是成分多、同分异构体多、化学性质差异大等。林力博士研究组前期通过文献检索收集化合物的物理化学信息和色谱信息,给后续的工作带来了很大的方便。

液质联用定性的步骤是:1.从总离子流图,提取离子流图;2.查看该离子图下的一级质谱图,明确分子离子峰;3.以此为母离子,做其二级质谱图,从得到的碎片来推断化合物的结构。并以丹参为例,介绍了丹参有效成分的定性研究步骤,同时强调了液相分离对中药成分定性研究的重要性。

林博士还与大家分享了在该项研究过程中的经验:比如对于碰撞参数的调整;分子量300以上的干扰少;本底离子和杂质会对二级质谱产生的影响,并提出使用过程中一定要注意管道清洗。

最后,林博士呼吁大家可以共享一些中药的二级谱图库,他本人已经建库的几十种中药也很愿意同有兴趣合作的液质联用单位分享。

《液质联用定性研究中药有效成分的测定方法》

 

准确的定量和快速筛查方法:用LC/MS/MS做临床氨基酸测定

来自AB公司的市场开拓专员 李丹博士,应大家的邀请,为大家做了《用LC/MS/MS做临床氨基酸测定》的报告。

氨基酸是构建生物机体的众多生物活性大分子之一,是构建细胞、修复组织的基础材料。氨基酸的平衡和适量的供应是人体健康的基本前提,任何一种氨基酸供应缺乏,都会影响免疫系统和其他正常功能的发挥,使人处于亚健康状态,变得比较容易遭受疾病的侵袭。

传统的氨基酸检测是用氨基酸分析仪。但采用此方法,存在检测氨基酸种类少(18种)、选择性差、定量不佳等问题。

针对这些问题,有人试着用质谱来检测氨基酸。但氨基酸的分子量都很小(一般在120左右)。上面林力博士也讲到,在用质谱做检测时,如果分量小于300,那么得到的结果干扰比较大。为此,AB公司把自己在蛋白质组学上的应用成果——iTRAQ试剂应用于临床氨基酸检测上,并捆绑了一种45种氨基酸标样的试剂盒,实现了氨基酸的准确定量和快速筛查。

iTRAQ试剂由分子量115和114的一对试剂组成,实验中,一组(如115)与待测样品孵育,一组(如114)与已知含量的45种氨基酸标样的试剂盒孵育,然后将二者混合,一起进LC-MS/MS检测。一个常规的液相流程大概为25分钟(超快速液相大概为15分钟)。

这种方法,结合了液相色谱的分离度,同时抗干扰能力、选择性强,定量准确、快速。两种孵育条件下的同样的氨基酸,在色谱上保留时间一致、一级质谱也完全一样(平衡子的作用);根据设定好的MRM方法,同样分子量的结合115的样品氨基酸,和结合114的氨基酸标样,在二级质谱中,氨基酸都作为中性丢失去除,仅留下特征性的115和114离子,利用他们的峰面积,可直接定量。这套试剂,大概成本在十几个美元/每次实验。这种应用在临床上,可用于肝性脑病、肾病、新生儿遗传病等筛查。

这里,在座的各位听众不得不佩服AB公司,他们真正是一个提供解决方案的公司,不仅制造质谱,还制造配套的试剂——提供给客户一揽子解决方案,并帮助客户赚钱。

二炮总医院已订购了该试剂盒,相信这个团队很快会有更新的成果推出。也希望有兴趣的LC-MS/MS人员与他们联系。

氨基酸的测定

45种氨基酸的临床意义

文章提到的厂商
推荐
热点排行
一周推荐
关闭