【求助】细胞株筛选平台优化

字体: 小中大 | 打印发表于: 2015-8-06 17:52 作者: bohe221 来源: 分析测试百科网

大家在做细胞株构建时（cho cell）,一般都用的是那个公司提供的平台？比如invitrogene的chos 和DG44，还是sigma的GS_CHO还是lonza或者别的公司的？大家买回来细胞和载体后，一般都对载体和细胞做了那些优化？对筛选策略做了那些调整？说具体点，不要说些纲领性的空话，要确实有效果的优化。比如对invitrogen提供的pcho1.0载体启动子做了那些变化，筛选标记做了那些变化，取得了什么效果？

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KGZ564 (2015-8-06 17:53:04)

我看一般用invitrogen的比较多至于载体优化这个一般是研究机密吧希望大牛出来讲讲分享一下果断mark
u234 (2015-8-06 17:53:29)

有人在用sigma SAFC的CHOZN系统吗
qianqin1977 (2015-8-06 17:53:48)

QUOTE:
原帖由 u234 于 2015-8-6 17:53 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

有人在用sigma SAFC的CHOZN系统吗
前面在新闻中看到过，貌似今年sigma重点推出的系统之一。
据说是目前唯一一个能在加压筛选系统内做定向插入的，不知道怎么去实现的
jude (2015-8-06 17:54:07)

锌指核酸酶敲除GS基因，然后MSX-free。
据说不少人感兴趣
dior (2015-8-06 17:54:27)

商业化的DHFR质粒可否推荐几个？
S6044 (2015-8-06 17:54:45)

Lonza GS大致怎么收费的呢，有朋友了解吗，Thanks
jude (2015-8-06 17:56:56)

因为专利问题，用invitrogen DG44的比较多。
提高表达量的方法只说一点：密码子优化的比较常用，改造载体的比较麻烦和不确定。
dior (2015-8-06 17:58:50)

QUOTE:
原帖由 jude 于 2015-8-6 17:56 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

因为专利问题，用invitrogen DG44的比较多。
提高表达量的方法只说一点：密码子优化的比较常用，改造载体的比较麻烦和不确定。
好像密码子优化在CHO细胞里作用比较有限吧（个人听说），不知层主的观点是来自实践还是文献？
dog002 (2015-8-06 17:59:09)

只实践过这个，因为比较简单，不同的表达量还是差别很大。
shenkunjie (2015-8-06 17:59:28)

听国外做细胞株的朋友说，他们很少有人用DHFR系统，大都转到GS上了。。。
shkudo (2015-8-06 18:00:04)

嗯。 GS是主流啊