黄曲霉素(Aflatoxins)

  黄曲霉素存在于花生、棉籽粉、玉米、干辣椒粉等食品中。霉菌的生长并不一定表明黄曲毒素的存在,因为黄曲毒素只有在湿度、温度适合及通风良好才会生成。黄曲霉素B类具有蓝色荧光,G类具有绿色荧光。除了蔬菜中常见的(B1,B2,G1,G2),还有存在喂食了有毒饲料的奶牛的牛奶中的黄曲霉素M,其中毒性最高的M的代谢物为4-羟基化的产物Bs.

  1993年黄曲霉毒素被世界卫生组织(WHO)的癌症研究机构划定为1类致癌物,是一种毒性极强的剧毒物质。黄曲霉毒素的危害性在于对人及动物肝脏组织有破坏作用,严重时,可导致肝癌甚至死亡。在天然污染的食品中以黄曲霉毒素b1最为多见。其毒性和致癌性也最强。

  

  1根据国标《GB/T 18979-2003》,使用柱后衍生方法可以在一次测定过程中,在同一荧光发射波长下同时检测出这六种黄曲霉素。(Pickering公司提供)

  经过黄曲霉素免疫亲和柱净化,经过柱后后衍生荧光检测。

纯化回收率

基质B1B2G1G2
玉米(Alfa 10ppb,OTA 14.3ppb)107%91%103%75%
大米(Alfa 10ppb,OTA 14.3ppb)107%93%98%85%
麦芽(Alfa 10ppb,OTA 14.3ppb)98%99%97%70%
葡萄干(Alfa 10ppb,OTA 14.3ppb)99%106%101%69%

  分析条件:

  色谱柱:MYCOTOX柱,1612124。

  温度:42℃

  流速:1.0mL/min

  流动相:MeOH,CH3CN,H2O; 22:22:56,

  柱后衍生条件:

  柱后衍生系统:Pinnacle PCX 1.4mL反应器

  温度:95℃

  试剂:I2 100mg/L 水溶液

  检测:荧光检测,氙灯

  激发波长:365nm 检测波长:430nm

  

仪器与耗材

货号名称品牌规格
46300-U黄曲霉素混合标准品Supleco溶于苯:乙腈(98:2) 1mL×5个
46323-U黄曲霉素B1标准品Supleco3ug/ml, 溶于苯:乙腈(98:2)
46324-U黄曲霉素B2标准品Supleco3ug/ml, 溶于苯:乙腈(98:2)
46325-U黄曲霉素G1标准品Supleco3ug/ml, 溶于苯:乙腈(98:2)
46326-U黄曲霉素G2标准品Supleco3ug/ml, 溶于苯:乙腈(98:2)
12058黄曲霉素免疫亲和柱AflaAflaCLEAN 样品前处理柱 分析黄曲霉素- 25 columns/box
1827-00110玻璃纤维滤纸Whatman11cm孔径1.5um
80665液相进样针Hamilton100ul
1153-1032柱后衍生系统Pickering反应体积1.4mL
1612124MYCOTOX反相柱PickeringC18,4.6×250 mm
18ECG001保护柱夹套Pickering带3个保护柱

  2. 根据国标《GB 5413.37—2010》食品安全国家标准乳和乳制品中黄曲霉毒素M1 的测定

   (摘自Sigma-Alchrich 公司)

  色谱柱:Ascentis Express C18, 2.7um, 2.1×100mm

  柱压:230bar

  流 速:0.3ml/min

  柱 温:35℃

  试液温度:20℃

  进样量:10ul

  流动相:A液,0.1%甲酸溶液; B液,乙腈-甲醇溶液(1+1)

时间(min)流动相A%流动相B%梯度变化曲线
068.032.0 
4.2555.045.0线性
5.000.0100.0线性
5.700.0100.0即时
6.0068.032.0线性

仪器与耗材

货号名称品牌规格
46319-U黄曲霉素M1标准品Supleco10ug/ml, 溶于乙腈
12058黄曲霉素免疫亲和柱AflaAflaCLEAN 样品前处理柱 分析黄曲霉素- 25 columns/box
53823-UAscentis Express C18Supleco2.7um, 2.1×100mm
AP-SE-12B固相萃取装置Ameritech方形12孔
AVP-7120真空系统Ameritech抽气速度:20L/min;真空度:200mbar
532122N针式过滤器Ameritech水系微孔滤膜13mm 0.22um 200个

  3 高效光化学反应法测定黄曲霉素B1(摘自LcTech)

  此法检测成本低,可用等度HPLC直接测定

  

  流动相:水/甲醇/乙腈:60/30/15 (v/v/v)

  流速:1.2mL

  进样量:100uL

  色谱柱:RP C18

  荧光检测:发射波长:365nm,接收波长:460nm

  

  光化学衍生是一种简单、便宜、灵活的技术,可提高很多分析物质检测的灵敏度和选择性。黄曲霉素B1可在8分钟以内出峰,且检测信号明显增强

货号名称品牌规格
46323-U黄曲霉素B1标准品Supleco3ug/ml, 溶于苯:乙腈(98:2)
12058黄曲霉素免疫亲和柱AflaAflaCLEAN 样品前处理柱 分析黄曲霉素- 25 columns/box
1100-3348UVE 光化学反应器Pickering光化学反应器单元,240V
10522黄曲霉毒素分析柱RP C18Lctech150×4.6mm
10523RP C18保护柱芯Lctech3个/包
10750保护柱套Lctech1个

  4根据《 GBT 17480-2008 饲料中黄曲霉毒素B1的测定酶联免疫吸附法》

  (LcTech公司提供)

  LCTech AflaREAD ELISA试剂盒能够定量检测黄曲霉素B1,即使是浓度很小的黄曲霉素B1,也能够定量检测。ELISA试剂盒能够快速、容易的从多种产品中分析出黄曲霉素B1,如坚果、杏仁、大米、玉米、香料或动物饲料。AflaREAD 的检测限非常低,为0.1 ppb.

货号名称品牌规格
11139AflaREAD ELISA试剂盒LcTech
  • ELISA 96孔板,
  • 标准溶液1-8(0-5 ng/mL)
  • 检测溶液
  • 洗液
  • 呈色溶液
  • 终止液
  • 稀释缓冲液
46323-U黄曲霉素B1标准品Supleco3ug/ml, 溶于苯:乙腈(98:2)