【求助】大肠杆菌发酵OD值问题

字体: 小中大 | 打印发表于: 2016-3-05 15:30 作者: sobi 来源: 分析测试百科网

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【求助】大肠杆菌发酵OD值问题

求助大神，制作重组大肠杆菌菌种，发酵。在制作种子的过程中，会用甘油保存种子供发酵使用，请问保存的时候种子的OD值为多少？

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最新回复

eor (2016-3-05 15:32:28)

直接刮斜面保藏就行了，干嘛用种子做甘油管保藏，用种子做甘油保藏稳定性不好吧？
HP007 (2016-3-05 15:32:51)

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原帖由 eor 于 2016-3-5 15:32 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
直接刮斜面保藏就行了，干嘛用种子做甘油管保藏，用种子做甘油保藏稳定性不好吧？
请问斜面在多少度保藏呢？
chenshuanhe (2016-3-05 15:33:30)

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原帖由 HP007 于 2016-3-5 15:32 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

请问斜面在多少度保藏呢？
我们一般都-20度保藏，可以随时拿来用的，如果想放置时间更长些就液氮保藏。
fangxiang (2016-3-05 15:33:47)

可以用30%甘油保存，一般在对数期，OD600为0.5.
ztonyc (2016-3-05 15:34:04)

一般对数期，就是挑去单菌落，摇瓶培养至OD0.8左右（大概5个小时），然后吸取800vl菌液加到含有50%的200vl灭菌甘油中，负80度或负44度保存，加到甘油中，要轻摇混匀。甘油终浓度一般10%，甘油浓度太高不好。
sobi (2016-3-05 15:34:34)

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原帖由 ztonyc 于 2016-3-5 15:34 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
一般对数期，就是挑去单菌落，摇瓶培养至OD0.8左右（大概5个小时），然后吸取800vl菌液加到含有50%的200vl灭菌甘油中，负80度或负44度保存，加到甘油中，要轻摇混匀。甘油终浓度一般10%，甘油浓度太高不好。 ...
od测方法，我们是稀释6-8倍左右，波长600直接测？我们结果都6左右，是怎么回事，是因为测的方法不同吗
sobi (2016-3-05 15:34:55)

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原帖由 fangxiang 于 2016-3-5 15:33 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
可以用30%甘油保存，一般在对数期，OD600为0.5.
你测OD方法有什么注意点吗？
45778 (2016-3-05 15:35:17)

无所谓，肉眼浑浊就可以了。
ququer787 (2016-3-05 15:35:40)

在0.5-0.8之间，大约从平板上挑取单菌落，在LB培养基中培养2-2.5小时左右；
17585602016 (2024-1-03 20:05:30)

大概要培养多久?OD值大概是多少？