【求助】 为啥 100V 35mA...

最新回复

• H2O (2015-4-29 17:32:11)

  
  是不是有蛋白污染啊，阻滞了

• jude (2015-4-29 17:32:56)

  
  好像是蛋白污染，从第一幅图能看出来buffer正常。

• ending (2015-4-29 17:33:35)

  
  恩 也有可能是跑胶的问题 以前我也出现过 换了胶后来ok了

• dog002 (2015-4-29 17:37:08)

  蛋白污染

• langlang (2015-4-29 17:37:26)

  楼主的样品是什么？PCR产物？酶切产物？提取的质粒？
  

• minran_1980 (2015-4-30 10:19:40)

  QUOTE:

  原帖由 langlang 于 2015-4-29 17:37 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  楼主的样品是什么？PCR产物？酶切产物？提取的质粒？
  

  pcr产物大小是816bp

• minran_1980 (2015-4-30 10:20:47)

  QUOTE:

  原帖由 dog002 于 2015-4-29 17:37 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  蛋白污染

  这个是已经提取很久的基因组拿去pcr的结果。。。

• minran_1980 (2015-4-30 10:21:27)

  QUOTE:

  原帖由 ending 于 2015-4-29 17:33 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  恩 也有可能是跑胶的问题 以前我也出现过 换了胶后来ok了

  这个是刚配制的1.5％的胶缓冲也是刚配制的

• DCS (2015-4-30 10:21:59)

  
  DNA降解了吧，泳道有弥散现象，这么两个样，建议以后往中间点样，避免边缘效应

• S6044 (2015-4-30 10:24:31)

  
  这个情况我们也遇到过，真没想过这个问题，有没有可能是形成了多聚体

• JK.jon (2015-4-30 10:28:48)

  减小一下上样量试试~~

  
  U]E0[S5BZ$~VY$H9S`31NF4.jpg

• yizhi (2015-4-30 10:29:24)

  
  确定引物和模板都正确吧？

• youyou99 (2015-4-30 10:29:55)

  点样孔附近的是蛋白

• xue258 (2015-4-30 10:31:39)

  
  降低胶浓度，试一下。

• milkdog (2015-4-30 10:31:57)

  没有DNA了

• purrr (2015-4-30 10:33:17)

  
  漂样了

• minran_1980 (2015-4-30 10:33:47)

  QUOTE:

  原帖由 purrr 于 2015-4-30 10:33 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  漂样了

  那那个亮点是啥

• minran_1980 (2015-4-30 10:34:18)

  QUOTE:

  原帖由 S6044 于 2015-4-30 10:24 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  这个情况我们也遇到过，真没想过这个问题，有没有可能是形成了多聚体

  那那个亮点是啥

• minran_1980 (2015-4-30 10:34:35)

  QUOTE:

  原帖由 yizhi 于 2015-4-30 10:29 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  确定引物和模板都正确吧？

  确定，以前是做的出来的，这次是pcr程序时间小改动
  94℃ 5min；35cycles（ 94℃ 20s， 58℃ 20s， 72℃ 45s ）；72 ℃ 7min ，模板1-2.5ul，25ul反应体系。引物浓度0.3皮
  

• minran_1980 (2015-4-30 10:35:13)

  QUOTE:

  原帖由 xue258 于 2015-4-30 10:31 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  降低胶浓度，试一下。

  浓度我觉得还是算低