食品中AFTB1与AFTM2残留检测——薄层层析法(三)

关键词:食品安全检测标准物质  食品微生物快速检测  农兽药残留检测  环境监测标准物质
③样品检测
a.硅胶G薄层板的制备:薄层板厚度0.3 mm,105℃活化2 h,在干燥器中保存1-12天。
b.点样:取5 cm×20 cm薄层板两块,距板下端3 cm处为起始线,距边缘1 cm处先点l0 uL AFTBl及AFTM,混合标准溶液(各0.04ug·mL-1),然后距左边3 cm处各点同一样液,最后在第二板的第二点上再滴加10弘L AF'r、岛与AFTM,混合标准溶液。一般可将薄层板放在盛有干燥硅胶的层析槽内点样,边加边用冷风吹干。
c.展开:需进行横展2次,纵展1次。步骤如下:
横展:在展开槽内加15 mL经无水硫酸钠脱水的无水乙醚(500 mL无水乙醚中加20 g无水硫酸钠)。将薄层板靠近标准点的一边置槽内,待展至薄层板另一边后,取出挥干。再重复展开1次。
纵展:将横展两次挥干后的薄层板,再用异丙醇+丙酮+苯+正己烷+石油醚+氯仿(5+10+10+10+10+55)混合展开剂纵展至前沿,距原点距离为10-112 cm取出挥干。
横展:将纵展挥干后的薄层板再用乙醚横展1-12次,展开方法同第一次横展。
d.观察与评定:在紫外线灯下将第一、第二薄层板相互比较观察,若第二板的第二点在AFTBl与.AFTM,标准点的相应处出现最低检测量(AFTM,与AFTBl的比移值依次为0.25和0.43),而在第一块薄层板相同位置未出现荧光点,则样品中AFTM,与A盯B1含量在方法的灵敏度以下。如第一块薄层板的相同位置上出现硫酸钠荧光点,则应注意第二块薄层板第二点的样液是否与滴加的标准点重叠。如重叠,再进行定量与确证试验。
e.稀释定量:样液中AFTB,与AFTM,荧光强度与AFTBl与AFTM,的最低检测量(0.0004 ug)的荧光强度一致,则牛乳、炼乳、牛乳粉、黄油样品中AFTM,依次为0.1、0.2、0.5、0.5及AFTBl含量(ug·kg)为0.5;猪组织肝、肾、瘦肉等样品均为0.2 pg·kg。如样液中AFTM。与AFTB。的荧光强度比最低检测量强,则根据其强度逐一进行检测,估计减少滴加体积数或经稀释后再滴加不同微升数,直至样液点的荧光强度与最低检测量点的荧光强度一致为止。