【讨论】C18柱对样品是否有吸附?

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【讨论】C18柱对样品是否有吸附?
使用Waters 的u-Bondapak C18柱(问过Waters工程师,说这个柱子不建议用纯水做流动相),
以纯化水为流动相,
在做系统适用性,进5标准溶液时,每针的峰面积逐渐增大,如:在做系统适用性,进5标准溶液时,每针的峰面积逐渐增大,如:
系统适用性进样
       
峰面积
       
RSD (NMT2.0%)
5 inj. STD
       
STD, inj.1
       
193622
       
5.2%
STD, inj.2
       
195587
STD, inj.3
       
196412
STD, inj.4
       
196032
STD, inj.5
       
218695因为RSD没有通过,就做了调查,发现继续进标准溶液,峰面积继续增大,增大至250000左右就稳定了。每次实验都如此。

前两天又发现个新问题,在峰面积稳定后打算正式做系统时,运行了一次洗针后,进了一针纯化水(空白),出现了很强的紫外吸收(不呈峰样,一个大包,高度是标准溶液的50倍左右,出了10分钟左右,才回到基线),又重新进了一针空白,正常,没有溶剂峰外的其他峰,于是进标准溶液,但峰面积变为300000,再逐渐降低至250000。

我想问的问题是:

产生这样现象的原因是什么?
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最新回复

  • efp (2016-4-11 10:20:43)

    看现象,可能是有一定的吸附。
    就像SPE(固相萃取)就是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附,与样品的基体和干扰化合物分离,然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附,达到分离和富集目标化合物的目的。其中填料就有C18。

    不过因为这个柱子不适合使用纯水,建议你仔细比较一下峰的形状,看是否有拖尾造成的面积的明显增加。
  • 双子座 (2016-4-11 10:21:02)

    峰型都正常,拖尾因子为1.2

    但是保留时间在峰面积变化时会飘,但峰面积稳定后,保留时间也就稳定了
  • mimima (2016-4-11 10:21:21)

    waters不建议你用纯水做流动相,而你非要用纯水做流动相?
    如果是这样的情况,有问题很正常
  • xiaoxiaoai (2016-4-11 10:21:40)

    波长多少,是否有梯度,化合物极性大小
  • 大大 (2016-4-11 10:22:01)

    应该是保留时间稳定了,峰面积就稳定了
  • p1900 (2016-4-11 10:22:20)

    我个人觉得是纯水不适合分析你的待测物,建议使用不同pH的缓冲液代替纯水。
  • mimima (2016-4-11 10:22:41)

    这个是USP方法,柱子的型号也是USP推荐的。所以我们是这么做的。
  • efp (2016-4-11 10:23:02)

    波长为254,等度洗脱,化合物极性不大。
  • wawa11 (2016-4-11 10:23:24)

    主要是考虑不改变药典方法,想知道什么导致这样的结果。
  • n111 (2016-4-11 10:23:43)

    问下合成的结晶用的什么溶剂,如果结晶用的甲醇或是乙腈,那就是吸附了
  • xgy412 (2016-4-11 10:24:04)

    没有用到,但是为什么如果用甲醇或乙腈结晶就会吸附呢?
  • 886爱 (2016-4-11 10:24:22)

    一般洗脱不是用甲醇乙腈,如果结晶析出,就是不容,流动相溶解不好,你想想它会去哪里
  • daomei (2016-4-11 10:24:42)

    还有一点就是,峰形如何,是不是逐渐变宽,柱效下降峰形不好
  • 钻石 (2016-4-11 10:25:07)

    没有,柱效、峰型和拖尾因子每针都很好,没有变化趋势。
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