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JCV:全自动定量PCR

2012.12.13

  来自意大利维罗纳大学等处的研究人员发表了题为“Quantification of cytomegalovirus DNA by a fully automated real-time PCR for early diagnosis and monitoring of active viral infection in solid organ transplant recipient”的文章,利用罗氏的全自动DNA提取系统:Cobas Taqman CMV检测方法,提出了一种监测和评估移植患者CMV感染的快速简单新方法,相关成果公布在Journal of Clinical Virology杂志上。

  利用定量实时PCR检测巨细胞病毒(CMV)DNA,是目前用于评估移植患者活动性感染(active infection)的一种诊断方法。作为一种参考检测工具,pp65抗原检测也被用于监测活动性CMV感染,以及为移植患者指导先发治疗。然而这种检测方法存在一些局限性,比如样品需要立即处理,检测过程耗时耗力,以及缺乏标准化的主观结果解释。

  在这篇文章中,研究人员介绍了一种新型定量PCR分析方法,这种方法结合了来自罗氏的一种全自动DNA提取系统:COBAS Ampliprep/ COBAS Taqman CMV检测,能在血浆中找出CMV-DNA,并将其与pp65抗原检测进行比对,监测实体器官移植患者(SOTRs)体内的活动性CMV感染情况。

  研究人员对来自45位患者的266个连续样本进行了监测,同时采用了pp65抗原检测方法,以及CMV-DNA定量实时PCR检测方法。

  结果表明通过这种全自动的定量PCR方法,研究人员能获得具有特异性和灵敏性的检测结果,这说明这种方法是一种监测和评估移植患者CMV感染的快速简单新方法,接下来研究人员还将进一步研究,希望能验证先发治疗的启动阈值。

  罗氏诊断的Cobas系列产品是疾病筛选,诊断和监测的一套著名产品,主要包括了生化免疫一体化血清工作站,血凝分析和尿液分析产品,

  快速血液与心血管检测的设备,病毒学与女性健康检测的PCR产品等。

  比如其中的生化免疫一体化血清工作站目前已在全球许多实验室中被应用,建立了“罗氏示范实验室”,国内的就有中信湘雅生殖与遗传专科医院,而且cobas模块也成为了越来越多疾病的检测筛选标准。今年cobas 4800 HPV检测就获得SFDA认证,可以同时检测HPV16、HPV18及有否其他12种高风险HPV病毒株。

  极为权威的美国阴道镜及宫颈病理学会(ASCCP)指南建议,结合巴氏涂片及高风险HPV基因检测进行“联合检测”。该指南指出,有HPV16或18感染的女性,就算巴氏涂片显示正常,也需要接受阴道镜检查。可见HPV16和18检测对宫颈癌预防的重要性。

  此前一项名为ATHENA的研究是美国最大型的宫颈癌注册研究,共入组47,000多名女性。这项研究应用cobas 4800 HPV检测,旨在分析高风险HPV基因型检测对宫颈癌筛查的重要性,并提供HPV 16、HPV 18基因型,能区分宫颈癌近期及远期风险的临床资料。结果表明,cobas 4800 HPV检测符合目前的检测标准,并且,在年龄30岁及以上的妇女中,每10位HPV 16和/或18阳性的女性中就有1位为宫颈癌前病变,而她们的巴氏涂片检查结果是正常的。

  并且感染HPV16或18的女性,发展为宫颈癌前病变的风险比不携带这类病毒的女性高35倍。HPV 16和18检测可帮助女性区分自己HPV感染的近期和远期风险,就此医生可以判断是否需立即予以临床处理,提供给她们更多恰当的个体化疾病治疗或随访。根据ASCCP指南,没有高风险HPV的女性在5年内无需再次检测。

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