【求助】大肠杆菌表达的蛋白占大肠杆菌总蛋白含量...

最新回复

• vtongli (2013-11-05 22:00:46)

  
  呵呵，其实我就是目测一下。你也可以用软件BandScan来估计。

• mercedes (2013-11-05 22:02:18)

  
  灰度扫描并不是件很容易的事，前提是你的胶做的很好，但一般情况下我们实验室自己至的胶往往很难分出漂亮的条带，看SCI文献中特别清晰的带会感到很郁闷，估计他们用的是预制胶。
  
  胶跑的比较好的前提下才有必要用软件进行测定，因为这类的软件主观性还是很大的，只是半定量分析，如果胶本身跑的不是很好，我个人感觉没太大的必要去做那个分析。
  
  常用的此类软件有Quantity One、BandScan及QScan等，随便下一个用用就是。

• mingming0638 (2013-11-05 22:02:44)

  
  总蛋白含量可以破碎菌体后，离心，取上清（得保证你的蛋白是可溶性表达）然后常规方法SDS—PAGE，bandscan粗略测一下相对量还可以吧。

• vtongli (2013-11-05 22:03:15)

  SDS-PAGE没有那么难，保证各种试剂新鲜一点，操作上多注意，洗脱的时间久一点，条带会非常漂亮，底色是透明的，我认为完全可以用软件分析。

• nikun230 (2013-11-05 22:03:49)

  介绍一个小发明，可以用来粗略计算目的蛋白的含量，但需要说明的是这不是我的发明，是我老师的发明，支持原创，尊重作者！
  用photoshop软件计算