如何处理液相色谱柱严重拖尾
液相色谱柱使用常见问题解决:
一、拖尾原因解决方法 :
原因:1、筛板阻塞
解决方法:1、a、反冲色谱柱 b、更换进口筛板 c、更换色谱柱
原因:2、色谱柱塌陷
解决方法:2、填充色谱柱
原因:3、干扰峰
解决方法:3、a、使用更长的色谱柱 b、改变流动相或更换色谱柱
原因:4、流动相PH选择错误
解决方法:4、调整PH值。对于碱性化合物,低PH值更有利于得到对称峰
原因:5、样品与填料表面的溶化点发生反应图
解决方法:5、a、加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂 b、更改色谱柱
二、早出的峰拖尾程度大于晚出的峰原因 解决方法
原因:1、柱外效应
解决方法:1、a、调整系统连接(使用更短、内径更小的管路) b、使用小体积的流通池 G、 K
三、增加时,脱尾更严重原因解决方法
原因:1、二级保留效应,反相模式
解决方法:1、a、加入三乙胺(或碱性样品) b、加入乙酸(或酸性样品) c、加入盐或缓冲剂(或离子化样品) d、更换一支柱子
原因:2、二级保留效应,正相模式
解决方法:2、a、加入三乙胺(或碱性样品) b、加入乙酸(或酸性样品) c、加入水(或多官能团化合物) d、试用另一种方法
原因:3、二级保留效应,离子对
解决方法:3、加入三乙胺(或碱性样品)
四、酸性或碱性化合物的峰拖尾原因解决方法
原因:1、缓冲不合适
解决方法:1、a、使用浓度50-100mM的缓冲液 b、使用Pka等于流动相PH值的缓冲液
五、额外的峰原因 解决方法
原因:1、样品中有其他组份
解决方法:1、正常
原因:2、前一次进样的洗脱峰
解决方法:2、a、增加运行时间或梯度斜率 b、提高流速
原因:3、空位或鬼峰
解决方法:3、a、检查流动相是否纯净 b、使用流动相作为样品溶剂 c、减少进样体积