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【求助】新手请求各位老师分析一下跑出来的怪异峰形
本人是一名液相新手,最近才开始学习使用HPLC,之前实验室都是用液相简单的跑一下乙醇,糖类,而我这次需要测的东西是NADH,中文全名为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸,即常说的还原型辅酶Ⅰ,查阅了许多文献,根据其中的一篇文献资料进行重复试验. 该文献的色谱分析条件为: 柱条件:Agilent1200series,columnstable-C18(250minx4.6mm)柱。 梯度洗脱条件:0min100%bufferA;10min50%bufferA;11min100%bufferA;15min100%bufferA。 流速1.0mL/min, 检测波长:254nm,340nm。 柱温:35℃。 bufferA:PH7.0 PBS(磷酸钾缓冲液) 本人所用柱子为inertsil OS-SP(C18)(150minx4.6mm)柱 用标准样品跑了一张如图,大约9min的时候出峰……如图所示 之后提取了酵母胞内的NADH跑了几次,出现的峰非常诡异,从9min开始,基线都开始不稳了……求各位老师分析下,需要改进什么,新手虚心请教!谢谢! 【求助】新手请求各位老师分析一下跑出来的怪异峰形
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最新回复
DCS (2015-3-02 15:46:49)
然后再重复标准品,出峰是否还是正常?
既然标准品正常,问题很可能出现在样品上。
样品处理最好改进一下
1221 (2015-3-02 15:47:18)
biabiade (2015-3-02 15:47:35)
vcve (2015-3-02 15:47:57)
你那肯定不是基线的问题,排除色谱柱问题的话,就样品和梯度的问题
1221 (2015-3-02 15:48:16)
dog002 (2015-3-02 16:32:05)
您的样品是如何制备的?
mercedes (2015-3-02 16:32:23)
ha111 (2015-3-02 16:32:43)
bangqi_k (2015-3-02 16:33:21)
october7 (2015-3-02 16:35:07)
pulala (2015-3-02 16:35:27)
喜乐lele (2015-3-02 16:35:50)
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同意!
喜乐lele (2015-3-02 16:36:15)
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