【转帖】如何杀灭所谓的”黑胶虫“

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【转帖】如何杀灭所谓的”黑胶虫“

尊敬的版主,各位战友:
你们好。在我发这份帖子的时候我还在犹豫,是否应该将我的经验如实地告诉给大家,因为所谓的黑胶虫污染十分普遍,难以消除,很多人谈黑色变,我究竟有怎样的方法消灭黑胶虫,我的观点和方法是否能得到大家的认可,无论怎样,我相信我的经验绝对值得大家借鉴,会对那些困扰于所谓的黑胶虫污染的战友们有所帮助。
首先,世界上根本就没有什么黑胶虫,没有人知道黑胶虫的英文名字是什么,没有哪个权威地方能够查到它的来源,没人知道是谁给它命的名。在微生物学上也没听说过有这么一类微生物。那么是谁给它起了个这么一个恐怖的名字呢?答案是一个什么都不懂或者是一个别有用心的人起的名字。
其次,黑胶虫是什么?黑胶虫其实就是一种耐药的细菌!!这在细胞培养中是常遇到的问题,常用的双抗抗菌谱窄,特别是青霉素对一些耐药菌抗菌效力很差,如培养的各种用液被这种耐药菌污染,自然就会在培养液中大量繁殖,这没什么奇怪的。
第三,如何杀灭所谓黑胶虫,根据我的经验换两种抗生素就可以了,用广谱的氨苄或头孢和庆大配合完全可以杀灭这种细菌,在不行就用四环一定可以杀灭的,这是我亲身体验!!听说有的地方还专门卖杀灭黑胶虫的培养基,真是生财有道啊。有些人还说什么国内所有的实验室都被什么黑胶虫污染了,真是别有用心,同志们,当我的细胞被这种菌污染后,我查了很多资料,最后我判断它就是一种细菌,因为它能够被抗生素抑制,我换了抗生素解决了问题,现在我的细胞长得很好。
听说有人把杀灭”黑胶虫“的培养基申请专利了,那我也可以申请了,这可是发明阿,哈哈,可这有什么用呢,为了挣钱,却给国内的科研界带来多大的困惑!
总之,黑胶虫是一种细菌,我们完全可以抑制或杀灭它。
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  • eor (2015-7-11 15:29:09)


    太及时了!正被这个问题困扰,我很同意你的观点,值得一试,多谢!!希望更多的人看到这个帖子!斑竹可以转一下.听说很多养细胞的多有类似的污染。楼主的方法值得借鉴。
  • 2541 (2015-7-11 15:29:25)


    所谓的”黑胶虫“其实是多种,因为没有明确的定义,所以都把看到的“颗粒”称作”黑胶虫“。
    目前已知的有:
    1、硅颗粒,80年代全球都有报道,后经检测其成分99%为硅,怀疑是液体长期存放在玻璃瓶,导致硅颗粒的产生,所以把血清和培养液的瓶子都改为塑料的。
    2、焦虫,寄生在牛的血细胞的寄生虫。
    如果是细菌,那就不能称为”黑胶虫“。
  • jude (2015-7-11 15:29:45)


    比较认同楼主的观点,只是不知道这种“焦虫”会在那些细胞系中寄生的。
  • wu11998866 (2015-7-11 15:30:03)


    尊敬的版主:你好。可否给出几篇文献,我们彻底把这个问题搞清楚,奉献给大家。如果是牛血细胞的寄生虫它的繁殖效率高不,大概几天一代?另外请您把焦虫的英文名字展示一下,我想我们一定能找到克制它的方法。
  • okhaha (2015-7-11 15:30:32)


    如果是一种细菌,微生物专家应该会认识,除非是目前还没有被发现的新品种(这可能性大吗?)。所以我建议:现在正受该问题困扰的朋友,找找微生物专家给看看,即使是新种,专家应该可以给一个答案。
  • wu11998866 (2015-7-11 15:31:03)

    实践是检验真理的唯一标准,如果大家碰到类似的问题,不妨一试,反正抗生素也不贵,我用的都是进口的,也就100多块钱,够用好一阵子啦!试好了,别忘了回来说一声,如果没效大家再共同想办法,真理总是越辩越明。
  • 3N4G (2015-7-11 15:31:24)


    那么到底是细菌还是硅颗粒呢??我也被这种东西困扰
  • baidukk (2015-7-11 15:31:44)


    细菌看得到么?
  • duchy (2015-7-11 15:32:16)

    QUOTE:

    原帖由 baidukk 于 2015-7-11 15:31 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

    细菌看得到么?
    细菌是可以看到的,放大400倍就可以看到了.如果那个细菌有鞭毛的话还可以看到在运动,我的细胞污染时我都看见的,而且一般数量较少时就能看到了
  • duchy (2015-7-11 15:32:32)


    我也同意楼主的意见,因为我的细胞从来都没有被黑胶虫污染,都是细菌或者真菌,所以我也一直不明白为什么老有人说被黑胶虫污染,今天才恍然大悟
  • any333 (2015-7-11 15:32:45)

    相关疾病:
    舌癌
    我养的舌癌SAS细胞好像也是这种状况,我现在每次操作前都用生理盐水冲洗4遍,当时干净了,但是第二天马上又长满了。能麻烦doctorwyz告诉我具体广谱的氨苄或头孢和庆大或者四环的具体用法吗?比如什么时候加,加多少剂量吗?谢谢!
  • vivian4123 (2015-7-11 15:33:05)


    赞!
    请问到底怎么判断是不是黑胶虫?有人告诉我他们是会动的,但是我的细胞里都是一个个的小黑点,不动的。按你的描述,细菌的话应该也是不动的,对吗?
  • wawa (2015-7-11 15:33:24)

    楼主您好!您所说的黑胶虫到底是什么样的?我的细胞好像也污染了,不知道是不是所谓的黑胶虫,您能把消灭它的具体配方说一下吗?万分感谢!
  • wu11998866 (2015-7-11 15:33:47)


    我用的这个配方:头孢和庆大各50微克/ml,应该会有效果的。四环的毒性较大,量要再减少,具体用多少根据你的实验情况定。祝大家实验顺利。
  • ssonglikihi (2015-7-11 15:34:03)


    楼主说的那个黑东西是不是很小的黑色的点点啊?放大100倍的时候会看到有黑点点,很小很小,400倍下虽然也看不清,但是能看到那些东西在动,好像在游泳的样子。非常小。
  • youyou99 (2015-7-11 15:35:44)

    我养的293细胞在剧烈操作后(胰酶彻底消化掉瓶内细胞,再从其他瓶的293传入293细胞)出现过比较明显和严重的“小黑点”现象,但我持续培养和观察了一周,发现对细胞生长确实影响不大,我甚至还冻存了一些这种293细胞。如果真是细菌污染,为什么培养基始终较透明,没见到浑浊呢?且细胞的生长状态较好又如何解释?到底是不是细菌,恐怕我们还是要心存一些疑问。
  • greenbee (2015-7-11 15:36:01)


    相关疾病:
    先天性卵巢发育不全综合征
    不知道我这个是不是黑胶虫:第一,是黑色的;第二,是会游动的扭动的小虫子样生物!第三,血清过滤后这种污染率降低很多,但偶尔还会污染,比如,今天。呜呜呜~~~~我的细胞啊!


    43599445.jpg

  • bs4665 (2015-7-11 15:36:39)

    不知道我这个是不是黑胶虫:第一,是黑色的;第二,是会游动的扭动的小虫子样生物!第三,血清过滤后这种污染率降低很多,但偶尔还会污染,比如,今天。呜呜呜~~~~我的细胞啊!

    ===============================================================================================================

    个人觉得该图片上黑点就是所谓的'黑焦虫',但本人亦同意前面战友所说,细胞培养中根本没有什么黑焦虫,常见的黑点少数为血清中沉淀颗粒,显得培养基不干净。多数为细菌,就象上面图片中的。我曾在试验中对出现的“黑焦虫”进行培养,接种到LB培炎基上,结果发现有细菌生长。本拟对之进行详细的细菌种属鉴定,但因事放弃了。凭经验推测,主要为革兰氏阳性细菌,所以一般抗生素效果不好,难以清除。由于污染实验室的阳性菌通常致病力弱,所以见到细胞未受较大影响,但“黑点”繁殖太多时,因为竞争营养及产生代谢产物的缘故,细胞状态还是会变差。建议:
    1.如果遇到这个东西,细胞能够重新复舒,强烈建议及早弃去污染了的细胞,以免同一培养箱中其他细胞被污染。我在作稳定表达细胞株快成功时遇到过这种情况,恨不忍心前功尽弃,结果加入3倍双抗以及庆大,还是没彻底搞掉,最终结果还是放弃,全部重头再来。
    2.如果细胞很快要收集用于检测试验(比如转染后),而黑点不多,细胞状态尚好,可以每日用PBS多洗数次,加入高剂量双抗(不一定有效,因为污染细胞的弱毒性细菌还是很多种)
    3.如果需要作转染,还是不宜用这种细胞,影响细胞状态较大,转染效果不好。
  • xevin (2015-7-11 15:37:06)

    图中箭头所示的黑点是死细胞吧?


    60435862.snap.jpg

  • xevin (2015-7-11 15:37:23)


    这些黑点是什么?(10倍物镜)


    16539320.snap.jpg

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