【求助】关于蛋白质预染marker的问题？

最新回复

• 98776langtao (2013-8-16 17:30:33)

  
  预染marker是一些纯化好的蛋白混合物，通过与染料共价耦连，在电泳过程中或转膜过程中可以观察到。
  通过膜上marker的情况可以估计转膜的效率，但不是绝对的。
  国产的是不好用，每次需要加很多，而且条带也不清楚，Sigma的不错。

• zwsyrt (2013-8-16 17:33:03)

  
  电泳的时候就可以看到预染marker，转膜后也可以看到膜上有条带。现在国产的一些预染marker效果也还可以，毕竟制造工艺不复杂。

• summerxx (2013-8-16 17:33:50)

  
  嘿嘿，国产的怕还是不行，我刚买了一种八条带的国货，但是跑胶的时候怎么也数不到八条，指示作用很不理想，五六百块那。国外的我没用过不好说。

• ukonptp (2013-8-16 17:35:24)

  我刚刚买的预染maker，效果不好，好像被稀释了，条带也不清晰，好像被稀释了，上了10微升的量，也不是很好，有些同学说TAKARA的还好，你试试！

• youyou99 (2013-8-16 17:35:44)

  用过晶美的，还不错

• bamboo16 (2013-8-16 17:36:22)

  
  谢谢各位的回帖！我对预染marker有了一些了解，现在主要的问题就是定购哪家的预染marker了，请问还有哪位用过预染marker的，提供点信息，还有哪个公司的预染marker比较好？

• yjf1026 (2013-8-16 17:40:45)

  
  fermentas公司的也可以

• xingyi08 (2013-8-16 17:41:41)

  
  我用的promega的不错！

• ritou1985 (2013-8-16 17:42:08)

  
  我用过genview的预染,只有170块钱,虽然上样5ul有点看不清楚,但上10ul就相当好了,转到PVDF膜上也相当的清楚,呵呵,只是次数较要用的少了一半而已,我觉得还是值得的吧.进口(2000-3000)的一般相对的国产的贵,但上样量少,我觉得算下来还是国产的值得吧

• caihong (2013-8-16 17:42:35)

  
  预染 marker, 有2种：单色预染 和 多色预染。当然，多色预染比较容易辨认，一般都选择多色预染。
  
  公司的选择，用过的几种marker比较，个人认为invitrogen的比较顺手，不过缺点是 比较贵。
  
  $$ 另一个重要问题，可以有目的性地选择，只要在你的蛋白大小最接近的那个条带是容易辨认的，当然这个就是上选。
  我举个例子说明一下：比如，你的目的蛋白 20kd.
  SeeBlue® Plus2 Pre-Stained Standard
  invitrogen
  LC5925
  这个预染marker 在22kd处 是粉色的，其余条带是蓝色，这就非常容易辨认了，一目了然，至于最后1，2个条带看不清楚，也没有大碍了。
  
  祝好运！

• tuuu2 (2013-8-16 17:45:40)

  
  选择多色预染marker,我用的是BioRad公司的，每次上5-10微升就可以很清楚的看到条带。

• 6327555 (2013-8-16 17:46:08)

  我用晶美的,不错的,其中有一条红带的那种,跑胶的时候,就能看到各KD蛋白分离的情况,而且即使你不小心错过了一点时间,也可以依据红色的那条带来确定目的蛋白的所在.

• cwcwcww (2013-8-16 17:46:30)

  
  国产的效果真的不太好，最近跑胶用的上海产的，说明书说让上样10微升，但是加大到20微升后都不清楚，而且，基本上很难跑出6条来

• toy (2013-8-16 17:48:31)

  NEB得挺好。

• idoww (2013-8-16 17:48:56)

  
  invitrogen的不错哦

• rxcc33 (2013-8-16 17:49:26)

  上海生工的就不错,我正在用

• wmp1234 (2013-8-16 17:49:50)

  
  Biorad 2ul/gel

• dongdongqiang (2013-8-16 17:51:49)

  
  推荐fermentas的，很清晰，每次3ul就可以很清楚了，在72KD处是红色的，也不是很贵，2*250ul好像是五六百吧。

• ero11 (2013-8-16 17:52:14)

  在这里问一句，做Western一定要用预染marker么，现在有新型的marker，能够和目的条带一起在胶片上显色的marker，用起来岂不更好用。

• DONT (2013-8-16 17:52:38)

  不知道楼上说的新型marker价钱怎么样？要是价格合适的话我想大家肯定会用的。