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棉酚检测——三氯化锑显色分光光度法
关键词：标准微粒 浊度标准物质 食品添加剂检测 食品安全快速检测棉酚检测——三氯化锑显色分光光度法
1．原理
样品中棉酚与三氯化锑氯仿液生成红色络合物，与标准比较定量。
2．仪器
分光光度计。
3．试剂
①浓HCl。
②饱和SbC13溶液：取30 g SbCl3，加氯仿100 mL，振摇，用时取上清液。
③醋酸酐。
④棉酚标准贮存液(100 gg·mL-1)：准确称取棉酚标准品5 mg于50 mL容量瓶中，用氯仿溶解并定容至刻度。
⑤棉酚标准应用液(10µg·mL-1)。
4．检测步骤
取l g样品于10 mL比色管中，加氯仿至刻度，加浓HCl 1 mL，振摇，过夜，弃酸层，取氯仿提取液1 mL于另一10 mL。比色管中，加5滴醋酸酐，加5 mL饱和SbCl3混匀，加氯仿至刻度，混匀，放20 min，用1 cm比色皿，空白管调零，于波长520 nm处比色(同时做空白试验)。
5．标准曲线制备
取标准应用液(10µg·mL叫)0．0mL、0．5 mL、1．0 mL 2．0 mL 2．5 mL、3．0 mL、3．5 mL、4．0 mL、4．5 mL、5．0 mL分别于10 mL比色管中，各加醋酸酐5滴，加饱和SbCl135mL，混匀，加氯仿至刻度，混匀，20 min后用1 cm比色皿，空白管调零，于波长520 nm处比色，分别记录吸光度，绘制标准曲线。
6．计算
X=(CS*1000)/[m*(V1/V2)*1000]
式中：x——棉子油中游离棉酚含量，mg·kg-1；
CS一—样液吸光度查标准曲线对应含量，µg；
V2——样液总体积，mL；
V1——样液检测体积，mL；
m——样品质量，g。
7．说明
SbCl3易水解，遇水立即浑浊，故操作中应注意器皿的干燥，如有水分应用醋酸酐洗后使用；如样液有水分，应经无水Na2SO4脱水后再加SbCl3。
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