技术服务详细描述

Donor vector

CRISPR是细菌和古细菌为应对病毒和质粒不断攻击而演化来的获得性免疫防御机制。Cas9系统中，crRNA（CRISPR-derived RNA）与tracrRNA（trans-activating RNA）结合形成的复合物能特异性识别靶基因序列，并引导Cas9核酸内切酶在靶定位点剪切双链DNA，随后，细胞的非同源末端连接修复机制（NHEJ）重新连接断裂处的基因组DNA，并引入插入或缺失突变。多数基因组编辑过程产生单或双等位基因的比例在1-80%之间，并受制于实验室平台、细胞转染效率、细胞类型和靶点DNA。基于如此多变的编辑效果，下游细胞株的筛选十分困难。

因此，在供体Donor载体上加入荧光或抗生素标记，对基因的敲入、敲除及其有效。吉满生物提供多种抗性或荧光的Donor载体，并可以选择使用普通载体瞬转，或使用超高滴度的腺病毒载体输送供体DNA和Cas9蛋白。突变型Cas9(通常为D10A)设计为只切断gRNA靶位点DNA的一条链，再通过Donor DNA被同源定向修复（HDR）修复，比NHEJ更不易出错。

基因敲除同源定向修复供体Donor载体
使用SV40 polyA终止靶基因的转录，筛选标记可以使用荧光和/或抗性，待构建成稳转株后，可以通过过表达CRE去除荧光和抗性。
基因标记同源定向修复供体Donor载体
通过荧光标记可以方便的检测内源基因的表达。包括融合表达荧光或使用IRES/T2A标记基因。
可以通过过表达CRE去除荧光和抗性。
AAVS1基因敲入同源定向修复供体Donor载体
AAVS1人类基因组safe-harbor位点能保证转入基因不被沉默，且无已知的副作用, 并已知转入基因的拷贝数，能确保其表达水平可被预测，简化表型解读。可以通过过表达CRE去除荧光和抗性。
Donor-Zero Vector
	Donor-Zero Vector用于客户定义其载体。

现货载体：

基因敲除	普通载体	价格
	DKO-01GP	询价
	DKO-02GP	询价
	DKO-01RP	询价
	DKO-01P	询价
基因Tagging
	DGT-01GP	询价
	DGT-01RP	询价
	DGT-02GP	询价
空载
	DZero-01	询价

 更多Donor 载体正在完善中。

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Cas9腺病毒服务

Cas9慢病毒服务

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