定量PCR 是在PCR定性技术基础上发展起来的核酸定量技术。实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出，它是一种在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，对未知模板进行定量分析的方法。该技术不仅实现了对DNA模板的定量，而且具有灵敏度高、特异性和可靠性更强、能实现多重反应、自动化程度高、无污染性、具实时性和准确性等特点，目前已广泛应用于分子生物学研究和医学研究等领域。

 

  实验用品准备 → 样本总RNA提取 →  RNA浓度检测 →反转录 → 普通PCR检测 → 荧光定量PCR检测 → 数据分析及结论。

客户方需提供：
   1．新鲜细胞，数量10⁶以上，肿瘤细胞30代以内，正常细胞不超过5代，细胞状态良好，无衰亡，无染菌等情况。
   2．新鲜冻存组织，一般200mg以上/指标。
   3．RNA样本，浓度500ng/μl以上，体积20μl以上，纯度 （OD260/OD280） 1.8-2.1之间，无降解。
   4．目的基因名称。

 

   包括引物设计合成每样本每指标约需10天。

 

   1．详细的荧光定量实验报告。

   2．基本的数据分析（每个样本复孔三次）。
   3．扩增曲线及熔解曲线 。                                

   4．引物信息及序列。