400-6699-117转1000
分析测试百科网 认证会员,请放心拨打!
参考报价: | 面议 | 型号: | CRISPR-Cas13d RNA编辑 |
品牌: | 枢密科技 | 产地: | 武汉 |
关注度: | 暂无 | 信息完整度: | |
样本: | 暂无样本 | 典型用户: | 暂无 |
400-6699-117转1000
CRISPR-Cas13d RNA编辑
一、原理及应用介绍
2017年Feng Zhang实验室发现切割RNA的Cas13a(之前称作C2c2),能够特异性地降低哺乳动物细胞中的内源性RNA和报告RNA水平。CRISPR/Cas13d是目前最新的VI-D类靶向RNA的CRISPR/Cas系统。Cas13d蛋白与之前发现的Cas13a/b/c相比蛋白更小,这种尺寸使其更容易包装到容量较小腺相关病毒(AAV)载体中。
CasRx(Cas13d的一种)蛋白能够通过sgRNA引导在哺乳动物细胞内对RNA定点切割,造成RNA降解,达到抑制基因表达的目的。CRISPR/Cas13d系统不借助细胞体内的RISC(RNA介导的沉默复合物),使其不仅能高效干扰细胞质RNA,而且能高效的干扰核内RNA(lncRNA等),弥补了了shRNA在核内RNA干扰上的不足。通过突变CasRx,得到失去了催化活性但保留了RNA结合活性的dCasRx,可用于介导mRNA选择性剪接。
图1.靶向RNA的CRISPR/CasRx系统(Konermann S,et al.Cell,2018)
应用领域
CRISPR/Cas13d:lncRNA(long non-coding RNA)、Pre-mRNA、mRNA等细胞质和细胞核内RNA的高效和高特异性干扰。
CRISPR/dCas13d:dCasRx介导pre-mRNA选择性剪接,改变不同转录本所占比例。
测试数据展示
根据目的基因ANXA4(mRNA annexin A4),MALAT1(Long Non-Coding RNA Metastasis-Associated Lung Adenocarcinoma Transcript 1)序列设计靶标gRNA,构建CRISPR/CasRx(CasRx-gRNA)系统载体,转染293T细胞进行Q-PCR检测。
图2.qPCR结果。ANXA4-2(CasRx-gRNA2)能够干扰ANXA4 mRNA的表达,MALAT1-1(CasRx-gRNA1)、MALAT1-2(CasRx-gRNA2)能够干扰MALAT1 lncRNA的表达。
二、我司提供病毒载体及细胞系构建服务
CRISPR-Cas13d RNA编辑信息由武汉枢密脑科学技术有限公司为您提供,如您想了解更多关于CRISPR-Cas13d RNA编辑报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。
注:该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案,不可用于临床诊断或治疗等相关用途