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实时荧光定量PCR(real-time PCR)
| 参考报价： | 100 RMB（人民币） | 型号： | 实时荧光定量PCR(real-time PCR) |
| 品牌： | 研载生物 | 产地： | 中国 |
| 关注度： | 暂无 | 信息完整度： |  |
| 样本： | 暂无样本 | 典型用户： | 暂无 |
| 价格范围 | 1-500 |
一、技术简介
实时PCR(real-time PCR)，属于定量PCR（Q-PCR）的一种，以一定时间内DNA的增幅量为基础进行DNA的定量分析。
Real time PCR 的定量使用荧光色素，目前有二种方法。一种是在ds DNA中插入特异的荧光色素，例如SYBR Green荧光染料；另一种使用一种能与增幅DNA序列中特定寡核酸序列相结合的一种荧光探针（probe），如Taqman探针。两种方法原理不同。SYBR Green荧光染料游离时不发光，当反应体系中存在双链DNA时，SYBR Green与双链DNA结合，此时才发光。Taqman探针带有一个荧光基团和一个淬灭基团，荧光基团连接在探针的5’末端，而淬灭基团则在3’末端。PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5′－3′外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，此时荧光基团发出的荧光信号可以被检测到。real time PCR 与 reverse transcription PCR 相结合，能用微量的RNA来找出特定时间、细胞、组织内的特别表达的遗传基因。这两种RT PCR的组合又被称之为“定量RT-PCR（quantitative RT-PCR）”。
二、实验流程
1. 提取RNA。
2. DNAse I 消化样品RNA 中的DNA。
3. RNA琼脂糖凝胶电泳。
4. RNA反转录为cDNA。
5. cDNA与引物质量检测。
6. 利用相对定量的方法分析目的基因表达量的情况。
7. 定量 PCR检测。
8. 分析扩增曲线和溶解曲线。
三、服务说明及结果
1. 客户提供：样本。
2. 公司提供：高质量的RNA、扩增曲线图、熔解曲线图、完整报告。
3. 实验周期：5-10个工作日。
实时PCR(real-time PCR)，属于定量PCR（Q-PCR）的一种，以一定时间内DNA的增幅量为基础进行DNA的定量分析。
Real time PCR 的定量使用荧光色素，目前有二种方法。一种是在ds DNA中插入特异的荧光色素，例如SYBR Green荧光染料；另一种使用一种能与增幅DNA序列中特定寡核酸序列相结合的一种荧光探针（probe），如Taqman探针。两种方法原理不同。SYBR Green荧光染料游离时不发光，当反应体系中存在双链DNA时，SYBR Green与双链DNA结合，此时才发光。Taqman探针带有一个荧光基团和一个淬灭基团，荧光基团连接在探针的5’末端，而淬灭基团则在3’末端。PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5′－3′外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，此时荧光基团发出的荧光信号可以被检测到。real time PCR 与 reverse transcription PCR 相结合，能用微量的RNA来找出特定时间、细胞、组织内的特别表达的遗传基因。这两种RT PCR的组合又被称之为“定量RT-PCR（quantitative RT-PCR）”。
二、实验流程
1. 提取RNA。
2. DNAse I 消化样品RNA 中的DNA。
3. RNA琼脂糖凝胶电泳。
4. RNA反转录为cDNA。
5. cDNA与引物质量检测。
6. 利用相对定量的方法分析目的基因表达量的情况。
7. 定量 PCR检测。
8. 分析扩增曲线和溶解曲线。
三、服务说明及结果
1. 客户提供：样本。
2. 公司提供：高质量的RNA、扩增曲线图、熔解曲线图、完整报告。
3. 实验周期：5-10个工作日。
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注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途
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