板孔中加入50ul碱性磷酸酶标记的针对抗原的特异性抗体(通常是25〜500ng 特异性抗体/ml),室温下孵育2h,洗涤。酶标抗体浓度应足够高,保证NPP为底物时在405nm下产生大约0.50吸光度 单位/h的光强度,或MUP为底物时产生1000〜1500荧光吸光度单位/h。应注意在 可得到试剂条件下设置阳性对照系统。...
板孔中加入 50/xl 碱性磷酸酶标记的针对抗原的特异性抗体(通 常 是 25〜500ng 特异性抗体/ml) ,室温下孵育 2 h,洗涤。酶标抗体浓度应足够高,保 证 NPP 为底物时在 405nm 下产生大约 0 •5 0 吸光度单位/h 的光强度,或 MUP 为底物时产生 1000〜1500 荧光吸光度单位/h。应注意在可得到试剂条件下设置阳性对照系统。...
试剂、试剂盒碱性磷酸酶标记的特异性抗体pbsn实验步骤一、附加材料(其他材料见基本方案)碱性磷酸酶标记的特异性抗体 标准抗原溶液待测抗原溶液:0.2〜10/ug抗原/ml,纯化或部分纯化,用PBSN配制,4°C下保存 圆底或锥底微量滴定板十字交叉连续稀释分析法确定包被试剂和碱性磷酸酶-抗体结合物的最适浓度,标准抗原溶液(包被试剂)和结合物(显色剂)浓度各不相同(见辅助方案)。...
[测定原理] 在碱性条件下,碱性磷酸酶将无色磷酸对硝基苯酚水解为黄色对硝基苯酚,在 405nm测定对硝基苯酚生成的速率,这个速率与血清中ALP活性成正比。反应需要Mg2+作为激活剂。 [常用测定方法] 测定ALP活性受到组织来源、底物类型、反应温度,特别是缓冲液种类的影 响,目前,世界范围内生化试剂主要生产厂家,生产的ALP检测试剂盒的主要差异就在于所使用的缓冲液不同。...
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