基质辅助激光解吸附电离-飞行时间串联质谱研究重组人促红细胞生成素一级结构

基质辅助激光解吸附电离-飞行时间串联质谱研究重组人促红细胞生成素一级结构

卢庄1 王杉2 代景泉1 王京兰1 张养军1 应万涛1 徐友宣2 钱小红1 吴侔天2 蔡耘1

1(军事医学科学院放射与辐射医学研究所，北京100850)
2(国家体育总局运动医学研究所兴奋剂检测中心，北京100029)

摘要建立了生物质谱研究rhEPO一级结构的系列方法，包括分子量、唾液酸含量以及Ⅳ_糖含量等糖基化性质的测定方法，并用于4种国产rhEPO样品的分析；在此基础上优化酶切条件，使测定的肽质量指纹谱(PMF)的覆盖率均达到98％ ，成功鉴定了4个样品中的全部Ⅳ-糖基化位点以及对分子中两对二硫键进行了结构确证，测定4个样品分子量分别为；27754．1±27．4Da、27941．4 4-23．2 Da、27682．5 4-22．0 Da和27914．74-22．5 Da；唾液酸含量分别为；5．0％、4．8％ 、5．6％ 和5．4％ ；糖含量分别为：34．3％、34．7％ 、34．1％ 和34．6％。此外还对4种产品在O一连接糖型及Ⅳ．连接糖型上的区别做了初步探讨。