用Multiporator在Hela 细胞中实现高效基因沉默

　　用 RNA 干扰可以实现特异的转录后基因表达抑制(基因沉默) ，这一过程可以由同源靶 mRNA 的双链 RNA 分子　　(dsRNA)来启动。

　　这一高度保守的机制在许多低等和高等的真核系统中存在，于 1998 年首次由Fire等通过对C.线虫的研究来阐述。

　　RNA 干扰中起关键作用的分子是 siRNA(小干扰 RNA) ，这是携 RNase 酶活性的 Dicer 蛋白作用的结果，Dicer 蛋白可以切割长双链 RNA 成 21-28 核苷长的片段。

　　在随后的步骤中，双链 siRNA 与多蛋白复合物 RISC(RNA 介导的沉默复合物)相结合，并且被分成单链。

　　互补的靶 mRNA 被识别并且同反义链结合，最终由携核酸酶活性的 RISC 复合物降解。

　　在哺乳动物细胞中，RNAi 可以通过加入或合成 siRNA 双链体，或通过可表达 shRNA 的载体系统来启动。基因表达的靶向、特异性抑制使得这一技术在基因功能的分析中特别有效。

　　在这一应用介绍中，我们会告诉大家Eppendorf 的 Multiporator 系统是如何高效地采用电转染的方法，将 siRNA分子介导入Hela 细胞中。