荧光法操作步骤

　　内容摘要：加入正己烷溶解残渣，定容到10 mI再吸收40 mL乙醚，充分振摇2 min，静止分层。醚层移至500 mL分液漏斗中。如此萃取4次，合并醚液，用等量水多次洗至中性，将醚液通过无水硫酸钠脱水后，在氮气流、真空下蒸干。加入正己烷溶解残渣，定容到10 mI，再吸取1 mL，定容到10 mL。

　　①样品处理：准确称取油样0.50 g(样品中含维生素E<0.2 mg)置于圆底烧瓶中，加维生素C O.9 g，无水乙醇12 ml。，接好冷凝器，在水浴上加热。当瓶内液体开始沸腾时，加入3 mL氢氧化钾水溶液。15 min后将瓶在水流中迅速冷却。随即加入40 mL蒸馏水使皂化物溶解，并移入250 mL分液漏斗中。加入40 mL乙醚，充分振摇2 min，静止分层。醚层移至500 mL分液漏斗中。如此萃取4次，合并醚液，用等量水多次洗至中性，将醚液通过无水硫酸钠脱水后，在氮气流、真空下蒸干。

　　加入正己烷溶解残渣，定容到10 mI再吸收40 mL乙醚，充分振摇2 min，静止分层。醚层移至500 mL分液漏斗中。如此萃取4次，合并醚液，用等量水多次洗至中性，将醚液通过无水硫酸钠脱水后，在氮气流、真空下蒸干。加入正己烷溶解残渣，定容到10 mI，再吸取1 mL，定容到10 mL。

　　②荧光测定：仪器工作条件(溶剂为正己烷时，溶剂不同时，激发波长和发射波长不同)。激发波长：295 nm;发射波长：324 nm。激发狭缝：3;发射狭缝：2;灵敏度：0.3×7。根据以上条件，分别测定a一维生素E标准使用液和样品溶液的荧光强度。