人脾脏树突状细胞的分离纯化与鉴定

【摘要】　目的　建立人脾脏体外培养树突状细胞的新方法。方法　人脾脏细胞悬液培养2 h 后获得贴壁的单核细胞,加入重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM CSF) 100μg/ L 或rhGM CSF 100μg/ L + 重组人白细胞介素4 (rhIL 4) 500 k/ L ,体外培养1 周,收集悬浮细胞,以流式细胞仪分析细胞表型及抗原内吞能力,allo MLR 检测细胞抗原呈递功能。结果　以细胞因子培养7 d 生成的悬浮细胞,20 %～80 %表达树突状细胞特异性标志CD1a ,表达高水平的MHC2 Ⅱ、B71、B72 分子,具有较强的抗原内吞能力,抗原内吞能力及T淋巴细胞活性与人外周血单核细胞培养获得的DC 相似。结论　从人脾脏获得的贴壁的单核细胞,体外以rhGM CSF + rhIL 4 培养,可以获得极其大量的树突状细胞。