苯并芘最新快速检测方法

　　苯并芘最新快速检测方法

　　苯并[a]芘是一种众所周知的有害有机化合物具有致突变和致癌的特点被环境保护署EPA列为环境优先控制污染物。食用油中苯并[a]芘的浓度极低分析非常困难。国家标准方法GB/T 22509-2008采用氧化铝固相萃取柱净化样品但氧化铝的活性不易控制样品处理过程复杂方法回收率难以得到保证。

　　本文应用维泰克科技武汉有限公司的HiCapt Benzo苯并[a]芘专用固相萃取柱开发了食用油中苯并[a]芘的快速检测方法该方法具有以下特点:专利创新的苯并[a]芘专用萃取填料、有效去除食用油中的中性脂肪和维生素等基质干扰、回收率稳定、重现、克服了传统方法中氧化铝活性不稳定的缺陷、方法简单、快速、节省溶剂只需要15mL溶剂、45min即可完成、传统分析大约需要800mL溶剂耗时8小时。是用于苯并[a]芘分析的一种好方法

　　1. 样品处理

　　1.1 样品提取参考国标GB/T GB/T 22509-2008

　　称取0.4g植物油取2mL正己烷溶解涡混1min待净化。

　　1.2 固相萃取柱净化HiCapt Benzo苯并芘专用柱(500mg/3mL)

　　1活化在HiCapt Benzo柱中依次加入5mL丙酮2 mL正己烷活化。

　　2萃取将待净化液加入HiCapt Benzo柱中在柱中正己烷液面为2mm时上样此过程不要使柱

　　干涸再用200μL正己烷淋洗样品管一并加入SPE柱中。流出液弃去。

　　3清洗待上样液完全流出后用3mL的乙酸乙酯:正己烷v/v=1:4溶液淋洗淋洗液弃去将小柱抽干。

　　4解吸3mL丙酮解吸收集解吸液。

　　5吹干及定容解吸液50℃氮气吹干加入异丙醇200μL溶解并定容待分析。

　　2.色谱条件

　　色谱柱HiSep C18-T (150 mm×4.6 mm i.d.5 μm)

　　流动相乙腈/水溶液(88:12v/ v)流速1 mL/min

　　荧光检测器激发波长384nm 发射波长406nm

　　柱温40℃进样量10 μL。

　　3. 苯并[a]芘标准溶液液的配制

　　储备溶液的配制

　　标准储备液1称取苯并[a]芘5mg用乙腈定容至10mL, 配制成500mg/L的标准储备液供HPLC分析

　　标准储备液2称取苯并[a]芘5mg用正己烷定容至10mL配制成500mg/L的标准储备液供SPE试验

　　将上述储备液密封后放置于4℃冰箱中避光保存至少6个月内稳定。

　　工作溶液的配制

　　取苯并[a]芘标准储备液1用乙腈稀释, 供HPLC分析取苯并[a]芘标准储备液2用正己烷稀释供SPE试验。 标准曲线将500mg/L的苯并[a]芘标准储备液1用乙腈稀释配制0.5、1.0、20、40μg/L的溶液绘制标准曲线。

　　4 结果

　　4.1 标准曲线与检出限

　　取0.51.020.040.0μg/L 4个浓度的系列标准溶液进样分析以样品浓度为Y轴、峰面积为X轴进行线性回归所得标准曲线如图1。线性范围为0.5~40μg/L,相关系数为0.99999。检出限以3倍信噪比计算本方法苯并[a]芘的检出限为0.03ug/kg。

　　4.2 回收率和精密度

　　分别加入低、中、高3种质量浓度的苯并[a]芘标准溶液于食用油样品中然后按照本实验方法进行测定回收率为92.8~98.5%见表1。图2为添加苯并[a]芘的食用油样品的色谱图。从该图可以看出没有杂质干扰且该方法具有较好的日内及日间精密度见表1其标准偏差分别小于5.55%和4.71%。

　　结果表明本实验方法对植物油中苯并[a]芘提取具有良好的回收率杂质去除效果好方法重复性好。详细内容见附件。