探针浓度对蛋白质2DNA 相互作用新型压电生物传感器的影响

摘　要:目的　探讨不同探针浓度对蛋白质2DNA 相互作用新型压电生物传感器结合效应的影响。方法　将6 种不同浓度NF2κB 顺式作用元件(DNA) 探针通过巯基化法固定在传感器的金膜表面,并与特异性蛋白NF2κB 的p65 亚基进行结合反应,通过计算机采集分析传感器频率数据,观察不同浓度探针与p65 亚基结合反应所引起的频率变化及反应所需的时间。结果　在DNA 顺式作用元件探针浓度为0. 25～3. 0μmol/ L 的范围内,随着探针浓度的增加,p65 蛋白与DNA 探针结合反应所引起的传感器频率变化逐渐增加,当探针浓度为2. 0μmol/ L 时所引起的频率变化与探针浓度为3. 0μmol/ L 所引起的频率变化差异无统计学意义( P > 0. 05) ;同时p65 蛋白与DNA 的结合反应平衡时间随着探针浓度的增加有缩短趋势,当探针浓度为2. 0μmol/ L 时,结合反应平衡时间最短为15min。结论　随着DNA 探针浓度的增加,蛋白质2DNA 结合反应引起的频率下降呈典型的饱和曲线趋势,探针浓度为2. 0μmol/ L 、反应时间为15min ,是蛋白质2DNA 相互作用压电生物传感器的最适结合反应条件。