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022.艾德科技史上最全表观遗传学产品线与服务,让你的研究冰爽一“夏”!
上一篇 / 下一篇 2013-12-13 13:41:18/ 个人分类:新品推荐
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产品概览
该MethylFlash™DNA羟甲基化定量检测试剂盒可提供比色法和荧光法两种检测方案,试剂盒内提供了最优化的缓冲液和试剂,通过检测微孔板上5-羟甲基胞嘧啶(5-hmC)的水平,以定量检测全基因组的DNA羟甲基化水平。
产品特点:
时间短---比色法或荧光法分析方便快捷、易操作,整个实验可在3小时45分钟之内完成;
灵敏度高---其中比色法检测极限为40pg的羟甲基化DNA,而荧光法检测灵敏度可至20pg的羟甲基化DNA;
特异性强---能高度特异的识别5-hmC,而不会与甲基化或未甲基化的胞嘧啶结合;
通量高---可拆卸96孔板模式让您可以根据自己的需要方便的进行手工或者高通量检测;
重复性好---操作简单,检测条件稳定且数据可靠。
图1、通过MethylFlash试剂盒能检测到高灵敏度的5-羟甲基化胞嘧啶。合成的羟甲基DNA按照不同的浓度加入反应孔,然后通过MethylFlash羟甲基定量试剂盒来测定。
DNA甲基化定量检测试剂盒(A-P-1034/1035)
该MethylFlash™DNA甲基化定量检测试剂盒可提供比色法和荧光法两种检测方案,试剂盒内提供了最优化的缓冲液和试剂,通过检测微孔板上5-mC的水平,以定量检测全基因组的DNA甲基化水平。MethylFlash™DNA甲基化定量试剂盒(比色法或荧光法)是之前的Methylamp™全基因组DNA甲基化定量试剂盒的改进版,该试剂盒简化了实验流程,并提高了结果的稳定性。本试剂盒使用了一种新颖的方法把背景信号降到最低,无需微孔板晾干和封闭步骤。与基于层析技术的方法(如HPLC或者质谱分析)相比,本产品检测5-mC更加经济且精确。
产品特点:
时间短---比色法或荧光法分析方便快捷、易操作,整个实验可在4小时之内完成;
重复性好---试剂盒内的新成分将背景信号降至最低,无需对微孔板进行晾干和封闭,分析操作更简单,结果更精确可靠、也更稳定;
灵敏度高---其中比色法检测极限为0.2ng的甲基化DNA,而荧光法检测灵敏度可至50pg的甲基化DNA;
特异性强---优化的抗体和增强型溶液,能高度特异的识别5-mC,而不会与未甲基化的胞嘧啶结合,在特定浓度的DNA样品中也不会结合羟甲基化的胞嘧啶;
标准品全---试剂盒中包括阳性和阴性对照,可适用于任何物种来源的甲基化DNA样品定量;
通量高---可拆卸96孔板模式让您可以根据自己的需要方便的进行手工或者高通量检测。
通过MethylFlash试剂盒能检测到高灵敏度、高特异性的甲基化DNA。合成未甲基化的DNA(含有50%的胞嘧啶)与甲基化的DNA(含有50%的5-甲基胞嘧啶)按照不同的浓度加入反应孔,然后通过MethylFlash甲基化DNA定量试剂盒(比色法)来测定。 小结:【有关于5-羟甲基胞嘧啶(5-hmC)和5-甲基胞嘧啶(5-mC)】
5-hmC是最近在动物组织中发现的被修饰的胞嘧啶。在表观遗传中,5-hmC与其前体5-mC可能发挥着不同的作用。目前尚不清楚其具体的功能,有证据表明5-hmC在基因表达开关调控中发挥重要作用。5-hmC的存在对于重新评估已发生的DNA甲基化很必要,对于确定在人健康和疾病状态下组织内5-hmC的相对分布和改变也很必要。在我们的MethylFlash™技术发明之前,还没有一种常规的鉴别5-hmC并将其与5-mC区分的检测方案。而我们以上介绍的两种产品的定量检测方法,不仅为您提供了检测5-羟甲基胞嘧啶(5-hmC)和5-甲基胞嘧啶(5-mC)的重要手段,而两种产品配套使用,可以合力定量检测这两种修饰新碱基。
DNA甲基化极速修饰试剂盒(A-P-1026)
BisulFlash™DNA修饰试剂盒提供了最优化的缓冲液配方和试剂,利用Epigentek研制的最新一DNA亚硫酸氢盐转化技术对DNA进行修饰。该独创的实验方案将DNA变性的同时进行亚硫酸氢盐转化操作。整个操作过程只需要30分钟。更重要的是,使用该试剂盒可减少90% DNA的损失,将样品中所有的胞嘧啶转换成尿嘧啶。传统的亚硫酸氢盐转化方法中首先是单独的变性步骤,
然后是亚硫酸氢钠转化步骤。而创新性的BisulFlash™方法,在整个亚硫酸氢转化过程中DNA始终处于变性状态,即DNA变性与亚硫酸氢盐转换是同步的。这种突破性的方案使得DNA的转化步骤速度更快、效率和准确度更高。我们持续对BisulFlash™试剂盒进行优化和创新,并努力为您提供如下四个关键方面的革新:
时间超短---无需任何试剂准备时间,仅需30分钟即可完成所有修饰步骤;
转化率高---能将所有未甲基化的胞嘧啶完全转变成尿嘧啶,转化效率超过99.99%;
DNA保护好---避免亚硫酸氢盐转化过程中90%的DNA被降解,从而获得更高的转化率;
灵敏度高---最低只需0.2 ng或者50个细胞的DNA样本即可实现甲基化。 图1、通过DNA甲基化极速修饰试剂盒能精确的演示DNA转换。本试剂盒含有被DNA甲基化酶处理过的50ng基因组DNA,该酶能甲基化其所有CpG位点。通过实时定量PCR利用大量CpG位点所含有多重启动子引物,扩增转换的DNA,然后直接测序。正确的转换(C-U)与错误转换(mCT)的比率,通过总胞嘧啶与甲基化CpGs的百分比来计算。左侧图像:正确的转换比率;右侧图像:不恰当或者错误的转换比率。
图B完整的胞嘧啶转换。通过DNA甲基化极速修饰试剂盒(货号:A-P-1026)处理来自3种癌细胞系的200ng基因组DNA,接下来,每个处理后的样本中未转换的DNA和转换的DNA,分别通过特异的未转换DNA引物和特异的转换DNA引物(beta-actin,110 bps)来测定定量检测。 全细胞亚硫酸氢盐修饰试剂盒(A-P-1016)---无需DNA提取
全细胞亚硫酸氢盐修饰试剂盒提供了一整套创新的必需试剂,运用独创的亚硫酸氢盐转化技术,在细胞和组织水平上直接对DNA进行转化修饰。整个过程仅需3小时。全细胞亚硫酸氢盐修饰试剂盒是针对研究大量微小初始样本DNA甲基化而设计的,例如:96/384孔板上培养的细胞、组织切片样品、显微解剖样品、活组织切片以及早期胚胎细胞/卵母细胞等等实验标本。 不同数量MCF-7细胞和分离于MCF-7细胞的DNA分别使用全细胞亚硫酸氢盐修饰试剂盒(A-P-1016)和一步法DNA甲基化修饰试剂盒(A-P-1010)进行修饰。10微升修饰DNA被洗脱,2微升用于实时定量PCR。一对引物或者一个探针设计用来放大beta-actin甲基化和未甲基化的等位基因。
快速MS-qPCR试剂盒(A-P-1028)
可让您的甲基化特异定量PCR操作更简便、更灵敏,重复性更好,尤其适用于使用痕量DNA作为模板进行快速MS-PCR的实验。新颖的热启动DNA聚合酶可以将MS-qPCR实验过程从近2.5小时缩短到不超过70分钟。高效的引物-亚硫酸氢盐DNA模板间退火效率提高了MSqPCR即qMSP的灵敏度和特异性。
图A:使用快速MS-qPCR试剂盒(货号:A-P-1028)进行荧光定量PCR;图像B:断点PCR。45个循环后就可以测定通过DNA甲基化极速修饰试剂盒(货号:A-P-1026)处理样本中完整转换的DNA和未转换DNA。
速度超快---极其快速,仅需70分钟即可完成操作;
特异性强---对MSP的高精确度和特异性,降低假阳性概率;
高效率---高扩增效率获得丰富的产物;
超简单---方便的混合试剂模式使得配置反应体系更简单,减少预混可能带来的操作风险;
重复性好---操作简便、结果可靠、分析条件稳定一致;
兼容性宽---可用于所有基于孔板的实时定量PCR设备;
小结:【MSP法、qMSP法和BSP法】
MSP是最为经典的检测特定基因是否甲基化有效手段,但是随着实验人员对于表观研究的更深入的探索,此法远远不能满足更高的要求。而我们推出的DNA甲基化极速修饰试剂盒(A-P-1026)和快速MS-qPCR试剂盒(A-P-1028)配合使用,可以做qMSP。使得研究者能购更清楚了解甲基化的微小变化。其中,DNA甲基化极速修饰试剂盒提供的便捷即用型转化混合试剂,单一的孵育温度再加上可重复性和DNA保护的特点,使得亚硫酸氢盐转化臻于完美。DNA甲基化极速修饰试剂盒下游可用于MS-PCR、荧光定量MS-PCR、HRM亚硫酸盐前处理、甲基化微芯片以及焦磷酸测序的样本制备。另外,由于其完美的胞嘧啶转化能力,该试剂盒能完美适用于新一代甲基化DNA测序,HRM分析和焦磷酸测序等。相关的产品请参见艾德科技官网。
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- 建立时间: 2013-03-27
- 更新时间: 2016-12-07