用精确质量测定及其轮廓离子提取高通量识别体外代谢物

       代谢物的早期识别，对于合成代谢稳定化合物、识别药理活性或有毒代谢物，为化学家提供了重要信息。串联四极杆LC-MS/MS 系统是代谢物筛查广泛使用的仪器，但它只能提供名义质量数据。最新发展的MassWork质谱技术能够将名义质量数据转变为精确质量数据，用于代谢物的精确分子式测定。另外，这个技术也能在单位质量分辨质谱上进行精确质量轮廓离子提取或质量亏损过滤，以消除假阳性色谱峰，这种方式大大提高了代谢物筛查的数据处理通量。这里描述了一种利用串联四极杆LC-MS 和采集后处理程序，进行体外代谢物识别的方式。


目的：

      利用单位质量分辨LC-MS的精确分子式识别、精确质量轮廓提取离子图（AMPXIC）和质量亏损过滤进行体外代谢物识别。

方法：

1、老鼠肝微粒体培养：异博定、洛哌胺、丁螺环酮
2、液相色谱/串联质谱Waters Quattro Micro，Agilent 1100 HPLC
3、利用采集后处理程序将名义质量数据转变为精确质量数据：
      采集后数据处理程序MassWorks在一次LC-MS运行，利用单一离子校正，将名义质量数据转变为精确质量数据。精确质量轮廓提取离子图（AMPXIC）或质量亏损过滤（MDF）程序，用于消除样品中的假阳性色谱峰或内源性干扰。

结果：

• 利用单一校正离子，第一阶段代谢物数据采集后处理，得到的质量精度在3~10 ppm，谱图准确度大于99.0%
• 通过精确质量测定和同位素轮廓方法过滤得到的精确质量轮廓提取里子图（AMPXIC），可以消除传统XIC图中假阳性色谱峰。
• 质量亏损过滤（MDF）技术的应用，需要对整个质量范围的全部离子，包括母药、代谢物和内源干扰物，进行精确质量测定，而这些不能通过单一校正离子得到。