标准正文
注射用抗人T细胞CD3鼠单抗
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汉语拼音:
Zhusheyong Kang Ren T Xibao CD3 Shu Dankang
英文名:
Mouse Monoclonal AntiMy against Human CD3 Antigen of T Lymphocyte forInjection
药物组成:
本品系以杂交瘤技术由人T淋巴细胞免疫BALB/C小鼠后，取脾细胞与BALB/c小鼠骨髓瘤细胞融合，得到稳定分泌抗CD3特异性抗体的杂交瘤细胞，用小鼠体内法制备抗体，经纯化冻干制成。
中西药分类:
生物制品（治疗类）
生物制品制备:
1 基本要求
生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具等应符合“凡例”的有关要求。
制备腹水应使用SPF的BALB/c小鼠或BAIB/c和瑞士小鼠的杂交子1代。
2制造
2.1杂交瘤细胞
能稳定分泌鼠抗人T淋巴细胞CD3单克隆抗体的杂交瘤细胞系，并符合“生物制品生产用动物细胞基质制备及检定规程”的有关规定。
2.2杂交瘤细胞库建立
应符合“生物制品生产用动物细胞基质制备及检定规程”的规定。
2.3细胞库的细胞检定
主细胞库和工作细胞库的细胞应按照“生物制品生产用动物细胞基质制备及检定规程”的规定做全面检定。除此之外，生细胞库细胞应进行以下项目的检定。
2.3.1细胞核型检查
可采用染色体检查法进行，检查100个细胞分裂中期的染色体，应符合鼠一鼠杂交瘤特征。
2.3.2抗体分泌稳定性
杂交瘤细胞体外传代培养3个月以上能稳定分泌特异性抗体。液氮保存的细胞应能复苏、扩增培养和稳定分泌特异性抗体。
2.3.3特异性
包括抗体相应靶抗原分子量的测定，与人的组织和细胞如胸腺、扁桃体、脾脏等以及人外周血各细胞成分的反应性，与T白血病细胞系、B白血病细胞系的反应性；也可用已知单克隆抗体进行竞争抑制试验。应符合抗人T淋巴细胞CD3分化抗原单克隆抗体的特异性。
2.3.4免疫球蛋白类及亚类
用抗小鼠1g类和亚类的特异性抗血清进行琼脂双扩散试验。
2.3.5亲和力
应不低于107 L/mol。
2.3.6交叉反应性检查
采用冰冻组织切片染色法进行。俭测与胸腺、扁桃体、淋巴结、脾脏、骨髓、血细胞、肺、肝、肾、膀胱、胃、肠、胰腺、腮腺、甲状腺、甲状旁腺、肾上腺、脑垂体、外周神经、卵巢、睾丸、皮肤、眼等人体组织器官的交叉反应性。
CD3抗原单克隆抗体除与胸腺、扁桃体、淋巴结、脾脏、胃肠黏膜淋巴小结及散在淋巴细胞（如在骨髓和血细胞中）等相应靶细胞有反应外，与人体其他重要组织器官、细胞反应为阴性。
2.4原液
2.4.1抗体腹水制备
2.4.1.1取工作细胞库中的杂交瘤细胞使其复苏并扩大培养。
2.4.1.2取适量扩增培养的杂交瘤细胞接种小鼠腹腔，每只小鼠腹腔注射5×105左右杂交瘤细胞。小鼠可先用降植烷或液体石蜡等预处理。
2.4.1.3无菌操作收集腹水，经适当处理后置-20℃以下保存。
2.4.1.4腹水检定
按3.1项进行。
2.4.2抗体纯化
2.4.2.1置腹水预处理
腹水合并，滤纸过滤。
2.4.2.1 IgG纯化
采用经批准的纯化工艺由腹水纯化IgG。
2.4.3纯化后处理
2.4.3.1纯化的IgG经56℃30分钟处理，离心去沉淀。
2.4.3.2病毒灭活
采用经批准的方法去除和灭活病毒。
2.4.3.3除菌
病毒灭活后的IgG经除菌过滤后，即为原液。
2.4.4原液检定
按3.2项进行。
2.5半成品
2.5.1半成品配制
按测定的蛋白质含量，将原液中的IgG用0.02mol/ L的PBS稀释至5mg/ml，加适宜稳定剂，除菌过滤后即为半成品。
2.5.2半成品检定
按3.3项进行。
2.6成品
2.6.1分批
应符合“生物制品分批规程”规定。
2.6.2分装及冻干
应符合“生物制品分装和冻干规程”规定。
2.6.3规格
复溶后为每瓶1ml，每瓶含单克隆抗体5mg。
2.6.4包装
应符合“生物制品包装规程”规定。
3检定
3.1腹水检定
3.1.1效价测定
采用免疫荧光法测抗体对正常人外周血单核细胞的反应性，其正常值范围的参考指标为66.0%士10%，抗体效价不低于1:5000。
3.1.2鼠源性病毒检查
依法检查（附录Ⅻ H），应无任何特定的鼠源性病毒。
3.1.3支原体检查
依法检查（附录Ⅻ B），应符合规定。
3.2原液检定
3.2.1蛋白质含量
依法测定（附录Ⅵ B第二法）。
3.2.2 pH值
应为6.5-7.5（附录Ⅴ A）。
3.2.3等电点
依法测定（附录Ⅳ D），应与对照品一致。
3.2.4纯度
3.2.4.1电泳法
依法测定（附录Ⅳ C）。分离胶胶浓度为10%，加样量应不低于10μg（考马斯亮蓝R250染色法）或5μg（银染法）。非还原法:应与对照品一致；还原法:经扫描仪扫描，免疫球蛋白重链和轻链的含量应不低于95.0%。
3.2.4.2高效液相色谱法
依法测定（附录Ⅲ B）。色谱往以适合分离分子质量为10-500kD蛋白质的色谱用凝胶为填充剂；流动相为0.1mol/L磷酸盐-0.1mol/L氯化钠缓冲液，pH7.0；上样量不低于20μg，于波长280nm处检测，以免疫球蛋白色谱峰计算理论板数应不低于1000。按面积归一化法计算，免疫球蛋白主峰面积应不低于总面积的95.0%。
3.2.5小鼠骨髓瘤细胞DNA残留量
依法检查（附录Ⅸ B），每1次人用剂量应不高于100pg。
3.3半成品检定
无菌检查
依法检查（附录Ⅻ A），应符合规定。
3.4成品检定
除复溶时间和水分测定外，应按标示量加入生理氯化钠溶液，复溶后进行其余各项检定。
3.4.1鉴别试验
采用免疫荧光法测抗体对正常人外周血单核细胞的反应性，其正常值范围的参考指标为66.0%士10%。
3.4.2物理检查
3.4.2.1外观
应为白色疏松体，复溶后为略带乳光的澄清液体。
3.4.2.2复溶时间
加1ml生理氯化钠溶液后，应在5分钟内完全溶解。
3.4.2.3可见异物
依法检查（附录Ⅴ B），应符合规定。
3.4.2.4装量差异
按附录ⅠA中装量差异项进行，应符合规定。
3.4.3化学检定
3.4.3.1水分
应不高于3.0%（附录Ⅶ D）。
3.4.3.2 pH值
应为6.5-7.5（附录Ⅴ A）。
3.4.3.3蛋白质含量
应为标示量的90%-110%（附录Ⅵ B第二法）。
3.4.4效价测定
采用免疫荧光法测抗体对正常人外周血单核细胞的反应性，其正常值范围的参考指标为66.0%士10%，抗体效价不低于1:10000。
3.4.5无菌检查
依法检查（附录Ⅻ A），应符合规定。
3.4.6异常毒性检查
依法检查（附录Ⅻ F），应符合规定。
3.4.7热原检查
依法检查（附录Ⅻ D），注射剂量按家兔体重每1kg注射2mg单克隆抗体，应符合规定。
4保存、运输及有效用
于2-8℃避光保存和运输。自分装之日起有效期为3年。
5使用说明
应符合“生物制品包装规程”规定。
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