猪胰激肽释放酶生产新工艺
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下一篇 2008-05-10 20:41:27/ 个人分类:可转让成果
(1)概况
激肽释放酶(kallikrein)属丝氨酸蛋白酶。广泛存在于血浆、胰、肾、颌下腺及尿中。药用激肽释放酶又称血管舒缓素,主要来自颌下腺或胰腺。
激肽释放酶能使毛细管和动脉血管舒张及通透性增加,使冠状血管动脉﹑脑﹑视网膜处的血流供应量增加,适用于高血压冠状血管及动脉血管硬化等症,对心绞痛﹑血管痉挛﹑肢端感觉异常﹑闭塞性血栓性﹑脉管炎﹑冻疮及创伤等症也有作用。
(2)技术特点
本技术采用盐析与疏水层析法相结合从猪胰脏中分离纯化激肽释放酶,纯度大于500u/mg,工艺收率达到85.0%以上,该工艺步骤简单、快速、回收率高,产品纯度高、稳定性好。且猪胰脏中还含有大量的胰酶、弹性蛋白酶、脂肪酶等,因此,疏水层析收集的非 目标蛋白洗脱液还可用作分离纯化其它几种酶的原料。
本实验中经过盐析处理后的上清液中盐浓度较高,可以直接作为疏水层析进料,不需要额外的处理步骤。
(3)市场分析
激肽释放酶与同类化学合成药相比,它具有易为人体吸收﹑代谢副作用小,长期使用安全的特点。
胰K的提取纯化方法很多,常见的有硫酸铵沉淀法﹑离子交换层析法﹑有机溶剂分级、亲和层析法等。目前,国际上基于胰K的纯化研究大多采用阴离子交换(通常为DEAE配基)结合阳离子交换(通常为CM配基)最后加一步凝胶过滤层析,并且离子交换过程中胰K洗脱都采用改变pH的方式,由于缓冲液的缓冲作用,使得柱内pH改变缓慢,周期延长,耗费大量缓冲液,如法国Graham S.Bailey的纯化过程,虽然经过三步纯化后胰K比活高达1254u/mg,可是收率只有28.4%;其次有采用离子交换层析与疏水层析结合或者离子交换层析与亲和层析相结合,步骤较多、纯化周期较长且成本也较高,如英国Talal S.EI.Thaher的纯化过程,虽然收率达到87%,但胰K比活只有156.3u/mg。
(4)合作方式:
技术转让。
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TAG: 高血压激肽释放酶