生物药物分析方法的考核指标及验证体系的建立

生物药物是一种用于诊断、预防以及治疗疾病的制品，为了保证生物药物用药的安全有效，需要通过生物药物分析手段来测定原料和制剂中药物及有关杂质的含量。而药物的质量标准建立在方法学研究基础之上，对于生物药物分析方法验证体系的建立，常采用质量源于设计的理念，来对药品分析实验所采用的分析方法是否完全达到了预期目标，或证明该分析方法而导致的结果判断错误的概率是否在允许范围之内。

生物药物的分析在实际生产中是十分必要的，通过药物分析手段来测定原料和制剂中药物及有关杂质的含量，控制药物生产至临床应用前药物的质量，生物药物分析的目的是确保保证用药的安全有效。美迪西生物分析服务部门拥有专业的科研团队，分析实验室配置先进的仪器设备，实行全面的信息化管理，实验研究符合FDA/CFDA GLP标准要求，服务内容涉及药代动力学、药效学、免疫原性和生物等效性等研究方面，为客户提供小分子药物、生物制剂、疫苗和生物标记物的筛选与开发，以及临床前和临床研究。

1、生物药物的种类：

（1）治疗药物，一般用在肿瘤、艾滋病等疾病的治疗上；

（2）预防药物，通过制成疫苗、菌苗、类毒素等来治疗传染性强的疾病；

（3）诊断疫苗，常见的诊断疫苗有酶诊断、基因诊断和免疫诊断等。该疫苗具有速度快、特效高等特点。

（4）用在食品、保健品、化妆品等领域的生物药物。

2、生物药物分析方法的考核指标

（1）精密度和准确度

同药物分析一样，精密度和准确度也是生物药物分析方法考核的重要指标，但考核的内容和方法有其特殊性。分析方法建立时的考核：（1）准确度和精密度测定可同时进行；（2）分析方法应用中的考核，测定样品时，加入质控样品作随行分析，可照标准曲线各浓度配制法；（3）样品测定次数与重复测定，一般只需作单样分析，只有少数不稳定样品或免疫分析方法才作双样分析，并应在方法考核中说明。

（2）检测限和定量限

近年有药物分析文献详细介绍检测限和定量限的定义和测定方法，生物药物分析也使用LOD和LOQ表示方法的灵敏度，但因生物样品量少，不能以增加取样量方式提高灵敏度，因此更强调LOQ，它反映了标准曲线低濃度端的可靠性，测定时记录各浓度每次测定得到的药物信号强度S与噪音强度N。

（3）标准曲线

所有生物药物分析方法都必须作标准曲线。浓度与响应值的函数关系可作成坐标图或用回归方程表示。考核标准曲线可以使用以下方法：（1）每次测定样品应同时作标准曲线，作法与考核时应完全一致；（2）标准浓度点5-8个，每个浓度测定1次或2次；（3）浓度上限为样品最高浓度的120%，下限为最低浓度的80%；（4）线性度r=0.9900，截距与最高浓度响应值之比应略高。

（4）选择性

选择性又称专属性，目前很多文献均列为考核指标，但考核的内容和方法尚未统一，下面为目前公认的应考核内容：生物基质的影响：可取3个以上不同个体的空白样品，考察正常生理情况下样品中生物基质的影响。药物代谢物和配伍用药物的影响：应针对可能存在的药物代谢物和合并用药，可将代谢物标准品和药物标准品加入空白样品以及加入供分析样品后再测定，观察是否有干扰。

（5）稳定性与萃取回收率

考核药物标准品溶液的稳定性，即在贮存条件下可稳定的时间。包括：（1）在室温中的稳定性；（2）冷冻条件下的稳定性；（3）此外还应考察加入稳定剂，考察样品提取物的稳定性。萃取回收率指预处理能够将生物样品内含药物多少比例分离出来供分析，它与分析方法的LOQ密切相关，可指导样品预处理。

（6）免疫分析、药物代谢分析与立体异构分析

免疫分析应着重考察结构相近化合物的交叉免疫干扰，并尽可能用色谱法核对结果。药物代谢物的分析应根据文献要求，对于测定代谢物或同时测定药物和代谢物的分析方法，应按照前述相同要求考核。药物立体异构体的分析，由于具立体异构的药物，其左、右旋体在体内的处置和生理活性都可能存在差异，分析生物样品中不同的药物立体异构体。

3、生物药物分析方法验证体系

近年来，质量源于设计的理念已逐渐被整个药品工业界所认可并实施。目前，QbD主要被用于新药的研发与生产，然而 ICH Q8 指导文件明确指出它还可以用于药物分析方法的建立、评估及验证上。有研究者将质量源于设计的思想融入到生物药物分析方法的建立与验证体系上来，以ELISA分析方法为例，介绍QbD用于药物分析方法建立与验证的过程。该体系对于管理方法的建设和革新具有指导意义和可操作性。

生物药物在新药研发中有着举足轻重的地位，提高对生物药物分析方法的验证研究，加大对方法建立和验证的管理，有助于促进生物药物的研发与应用。