药物杂质分析方法之紫外可见分光光度法

在药物研发中，药物中会存在无治疗作用或者影响药物疗效和稳定性的杂质，这些杂质甚至会对人体健康造成危害。因此进行药物杂质分析并控制药物中的杂质含量，为确保用药安全有效提供保障。分光光度法是一种对待测物质进行定性和定量分析的方法，紫外可见分光光度法是其方法之一，可用于药物杂质分析、药物鉴别和含量测定等方面。

药物来源具有多样性和复杂性，加上药物结构和性质的特点，在药物生产、储藏和使用过程中，不可避免地会引入杂质。当药物中含有的杂质超过质量标准规定的纯度要求时，可能使药物的外观性状、理化常数发生改变，含量明显偏低或者药物活性降低等，不仅会影响药物的质量，还能反映出生产工艺中存在的问题。药物杂质分析对于药物质量的检验与控制起到重要作用。美迪西提供药物杂质分析服务，可以利用HPLC等各种技术分离监管起始原料、中间体、API和药物产品中的杂质。

分光光度法是通过测定待测物质在特定波长处或一定波长范围内的吸光度或发光强度，对待测物质进行定性和定量分析的方法，紫外可见分光光度法可在190~800nm波长范围内测定物质的吸光度。当光穿过被测物质溶液时，物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此紫外分光光度法通过测定物质在不同波长出的吸光度，并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。从吸收光谱中，可以确定最大吸收波长和最小吸收波长，物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性。用于定量时，在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度，并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或采用吸收系数法求算出样品溶液的浓度。

紫外分光光度计已有是一种比较成熟常用的分析方法，应用广泛，国内外应用主要集中在快速监测水样中金属离子和有机污染物，抗生素、维生素等药物检测，对饮料或发酵产品进行质量控制，测算氨基酸含量，乳制品蛋白质含量监测，分析农药及其残留物中有害物质，控制石油产品质量和测定饲料中添加剂等物质含量等方面。

我国有研究者利用紫外分光光度法(紫外分光光度法)测定氨甲苯酸葡萄糖注射液中氨甲苯酸的含量。方法是确定测定波长，进行线性分析，考察干扰性、稳定性、重现性、回收率。结果发现氨甲苯酸浓度在4.8～11.2μg/mL范围内与吸收度A呈良好线性关系，用紫外分光光度法测定无干扰。因此氨甲苯酸葡萄糖注射液定量稀释后可用紫外分光光度法测定其氨甲苯酸的含量。

葡萄糖注射液或葡萄糖口服制剂中的葡萄糖在高温或弱酸等条件下脱水会产生5-HMF，过量的5-HMF对人体横纹肌和内脏是有损害的。5-HMF含量的控制是很重要的质量指标。5-HMF的最大吸收波长为284nm，该处干扰较少，紫外分光光度法常可以作为5-HMF检查的首选方法。如中国药典2000、BP2000、USP27和日本药局方中纳入的葡萄糖注射液，均采用紫外分光光度法控制5-羟甲基糠醛含量。如果制剂中的主药或辅料在284nm有明显的吸收，会干扰5-HMF的检查，可采用HPLC法代替。

紫外分光光度法用于喜树碱含量的测定^[1]。由于喜树碱内酯环开环后在254nm波长下紫外吸收增强，而开环的喜树碱毒副作用大。鉴于目前喜树碱含量测定均采用254nm，且喜树碱在大多数溶剂中溶解性较差，为更准确便捷地检测喜树碱原料药的含量，有必要探索在新的波长下测定喜树碱含量的方法。

研究者将喜树碱在200~400nm扫描，发现在367nm处有较大吸收，且溶剂二甲基亚砜无干扰。因此采用367nm波长下测定喜树碱含量，并进行含量测定方法学考察。喜树碱的标准曲线方程为y=0.0423x+0.0132，r=0.9996，浓度在4~20μg/mL与其吸光度呈现良好的线性关系。平均加样回收率为101.76%，RSD为0.75%，结果重现性良好，符合方法学要求。在367nm波长下测定喜树碱含量，所受干扰较小，测定结果可信度高。

药物的价值在于为人们的生命和健康提供保障，帮助病人预防或摆脱疾病的困扰，为了最大可能地发挥药物的价值，就必须要进行药物杂质分析，去掉有害杂质，尽最大可能地消除危害人体健康的不利因素。紫外可见分光光度在是一项专属性较强的分析方法，可以直接用于药物成分、含量的专一和有效的测定，在药物杂质分析和药物含量分析中具有重大作用。

[1]紫外可见分光光度法应用于抗生素类药物检测[J].