浅析PRR11蛋白表达与癌症的关系

肿瘤病毒是能够导致肿瘤发生的病毒，PRR11是新近发现的位于染色体17q11的新基因，初步研究表明其参与细胞增殖、细胞周期和细胞癌变等多种生物学过程。采用酵母双杂交技术筛选PRR11的相互作用蛋白，为深入研究其分子行为机制奠定基础。酵母双杂交服务可以为肿瘤基因表达研究、蛋白质组学研究、细胞周期调控及细胞信号转导研究提供技术支持和帮助。

恶性肿瘤是威胁人类生命健康安全的主要杀手，其发生是一个多因素作用、多基因参与和经过多个阶段最终形成的极其复杂的生物学现象。寻找并鉴定新的恶性肿瘤相关基因对于阐明肿瘤发生发展的分子机制具有重要意义。酵母双杂交技术是研究蛋白与蛋白相互作用的重要技术手段，已广泛地应用于蛋白质与蛋白质、蛋白质与DNA、蛋白质与RNA以及蛋白与其他小分子间相互作用的研究，美迪西公司提供酵母双杂交服务。

1、利用酵母双杂交技术筛选PRR11的相互作用蛋白

有研究者构建用于酵母双杂交筛选的PRR11诱饵质粒并检测其自激活作用，根据结果进一步构建突变体获得具有较低自激活作用的突变体^[1]。研究者对人胎脑cDNA文库进行筛选，获得初始阳性克隆。通过LacZ报告基因检测、回转验证、阳性克隆测序及BLAST序列比对分析，排除假阳性克隆和重复克隆，确定PRR11的候选相互作用蛋白。

结果发现PRR11具有自激活作用，构建了一个较低自激活作用的PRR11突变体。通过酵母双杂交筛选，获得102个初始阳性克隆转化子。经LacZ报告基因检测，将阳性克隆锁定至39个。通过测序和序列比对分析，证实这39个克隆属于编码15种不同蛋白的基因。最终有RNF41等4个蛋白通过回转验证。因此RNF41、SCG5、BCYRN1和PRR13是PRR11的潜在相互作用蛋白。其中RNF41是一种E3泛素连接酶，具有泛素连接酶活性，在心脏的发育过程和功能形成过程中起到关键作用；而BCYRN1蛋白在多种癌症中表达异常，这种异常表达可能与癌症的发生和发展存在着一定的关系；PRR13表达的改变会造成紫杉醇的耐药，又名为紫杉醇耐药基因-1。

癌基因是能够导致细胞发生恶性转化和诱发癌症的基因，绝大多数癌基因是细胞内正常的原癌基因突变或表达水平异常升高转变而来，某些病毒也携带癌基因。PRR11癌基因在肺癌、胰腺癌和胃癌中高表达，且与疾病进展存在相关性。

2、PRR11蛋白表达与胃癌的关系

检测PRR11蛋白在胃癌中的表达，分析其表达异常与胃癌临床指标及预后间的关系^[2]。用Western印迹分析比较胃癌和正常组织中PRR11的表达。构建含167例胃癌的组织芯片，用免疫组化法检测PRR11蛋白在胃癌组织中的表达，统计学分析其与肿瘤大小、肿瘤侵袭、组织分化、淋巴结转移、TNM分期及胃癌患者总生存期之间的关系。

PRR11在胃癌组织中的表达高于癌旁组织，在胃癌中的表达率为50.9%(85/167)，而在癌旁黏膜中不表达或微弱表达。PRR11的表达与胃壁侵袭、淋巴结转移、疾病分期和组织分化呈正相关(P0.05)。单因素生存分析表明，PRR11蛋白阳性表达患者较阴性患者生存期短(45个月vs81个月，P0.001)。多因素生存分析也表明，PRR11蛋白阳性表达患者生存期短于阴性患者(95%CI:0.347~0.865，P=0.01)。高表达PRR11与胃癌的发生、进展及预后密切相关，是判断胃癌患者预后的重要指标之一。

3、PRR11蛋白表达与胰腺癌的关系

有研究者研究探讨了PRR11蛋白在人胰腺癌中的表达，并探讨其与胰腺癌临床病理参数之间的关系^[3]。方法是采用免疫组织化学SP法检测32例人胰腺癌组织、20例癌旁组织和6例正常胰腺组织中的PRR11蛋白的表达，并采用χ2检验分析PRR11蛋白的表达水平与临床病理参数(年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位、分化程度、淋巴结转移和TNM分期)之间的关系。

结果发现PRR11蛋白在胰腺癌组、癌旁组织组和正常胰腺组织组的阳性表达率分别为78.1%(25/32)、5.0%(1/20)和0.0%(0/6)，胰腺癌组的表达显著高于癌旁组织组及正常胰腺组织组(P0.05)。生存分析显示，PRR11蛋白阳性组患者的生存率低于阴性组(P<0.05)。因此检测PRR11蛋白在胰腺癌中的表达，有望成为判断胰腺癌预后的一个指标。

恶性肿瘤细胞的最基本生物学特征之一是肿瘤细胞的失控性增殖，而肿瘤细胞的失控性增殖的生物学基础在于细胞周期调控发生紊乱。在细胞周期中S期最为关键，PRR11是一种新型的可以调节S期和细胞有丝分裂过程的细胞周期相关基因。除了上述研究之外，还有许多的研究表明PRR11蛋白对肿瘤的发生、发展预后及生物细胞周期有着一定的影响。因此PRR11是一个新的潜在的癌症诊断和治疗靶点，对于开发新的肿瘤诊断、预防和治疗癌症具有重要意义

[1]基于酵母双杂交技术的PRR11相互作用蛋白筛选与初步分析[J].

[2]PRR11在胃癌中的表达及其与预后的关系[J].