Sephadex G25（C-BETB002）应用实例说明

Sephadex G25是一种葡聚糖层析培养基。在Sephadex G25中，提取物的交联度决定了大分子渗透珠的程度。大分子被排除在外，而小分子根据其不同的尺寸在不同程度上进入珠粒。因此，大分子首先离开柱子，然后是小分子。根据不同的粒度，Sephadex G25有四个等级（粗、中、细和超细）。

艾美捷Sephadex G25：

Cat #: C-BETB002

Size:

1. Resin: 10 mL, 50 mL, 100 mL, 250 mL, 500 mL, 1 L;

2. Prepacked Column: 5mL-Column

Storage: 20% ethanol or 0.01 M NaOH, 4-30°C

Sephadex G25应用实例：
色谱柱：XK16/30脱盐柱，柱高25cm（Sephadex G25M）。

平衡缓冲液：20mM PB+150mM NaCl，pH 7.0，通过0.45μm过滤器过滤。

流速：2mL/min。

柱平衡：将色谱柱连接到纯化仪器上，用2-3柱体积（CV）的平衡缓冲液洗涤脱盐柱。

样品装载：添加1 mL样品，以最大限度地延长色谱柱的使用寿命，样品应在装载前进行澄清，例如以10000 g离心10分钟或通过0.45μm过滤器过滤。洗脱：用平衡缓冲液洗涤脱盐柱至少2 CV，流速不超过建议的最大流速。

色谱图如下：

图1 5mL柱脱盐色谱图

使用方法：

Sephadex G25通常用于不同分子量蛋白质的脱盐、缓冲液交换和分离。样品体积根据具体应用而变化，对于缓冲液交换或脱盐，它可以高达柱体积的20%。

Sephadex G25培养基需要第一次溶胀。放入过量的去离子水中并溶胀，例如，加入100-150 mL水使10g介质溶胀，并使其溶胀至少3小时。也可以通过使用水浴加速溶胀（例如，在90°C下溶胀1小时），但应避免剧烈搅拌以防止凝胶破裂。

脱盐介质&脱盐柱相关研究：

货号 名称

C-BETB002-100mL Sephadex G25, 100mL

C-BETB002-10mL Sephadex G25, 10mL

C-BETB002-1L Sephadex G25, 1L

C-BETB002-250mL Sephadex G25, 250mL

C-BETB002-500mL Sephadex G25, 500mL

C-BETB002-50mL Sephadex G25, 50mL

C-BETB002-5mL-Column Sephadex G25, 5mL Prepacked Column

应用：利用分子筛作用，进行缓冲液交换、脱盐，分离并去除小分子; 工业脱盐。

备注：按凝胶介质粒径不同，Sephadex G25系列介质可分为四类，分别为：Sephadex G25粗， Sephadex G25中等，Sephadex G25细和 Sephadex G25超细，上表的Sephadex G25属于Sephadex G25（M）中等。  

https://www.amyjet.com/products/C-BETB002-100mL.shtml