脂肪酸β-氧化活性测定基于辛酰基CoA的氧化,其与INT还原为INT甲zan的NADH依赖性还原偶联。甲zan产物在492nm处表现出最大吸收(消光系数=18mm-1cm-1),允许灵敏地测量细胞/组织提取物中存在的FAO活性。请注意,FAO的活性受所用细胞/组织的线粒体含量的影响。如果储存和处理得当,套件组件至少可以稳定一年。
Assay Genie脂肪酸氧化 (FAO) 检测试剂盒是一种高度灵敏的试剂盒 用于定量测量脂肪酸的比色法 细胞和组织中的氧化。
艾美捷 FAO检测试剂盒以多个单独的成分(装在6个小瓶中)装运,以确保试剂在没有干冰的情况下至少一周的完整性。重建前,将试剂盒储存在4℃。请按照以下说明重新配制FAO分析溶液和20倍FAO基质溶液。
中文名称:脂肪酸氧化 (FAO) 检测试剂盒
英文名字:Fatty Acid Oxidation (FAO) Assay Kit
货号:BR00001
规格:48assays
Fatty Acid Oxidation (FAO) Assay Kit组分:
1.FAO测定溶液-5 ml(用于100个孔),储存在-70°C(测定过程中遮光溶液)
2.20倍FAO底物(20倍辛烷酰基辅酶A)-0.25 ml,储存在70°C
3.10倍细胞裂解溶液-25 ml,储存于4°C(含1%TX-100;稀释前短暂旋转瓶)
重构一个FAO检测试剂盒(5 ml FAO检测溶液和0.25 ml 20x FAO基质)
FAO测定溶液(5 ml)的重组:
1.在室温下解冻试剂1(0.5 ml棕色微管)。将FAO含量测定溶液(5毫升装在绿盖小瓶中)置于冰上。
2.将试剂1溶液转移到FAO分析溶液中,并立即混合溶液以防止试剂沉淀。把冰上的混合溶液遮光。
3.轻敲试剂2小瓶(透明微管),将内容物放入其中。将试剂2的内容物转移到FAO分析溶液中,并通过轻轻搅拌溶解内容物(如有必要,用一些FAO分析液冲洗干净的小瓶,以确保完全转移)。在遮光的冰上轻轻搅拌FAOAssay溶液约5分钟。重构的FAO含量测定溶液应储存在-70℃下。
重组20倍FAO基质(0.25毫升):
1.轻敲20 x FAO基质小瓶(透明微管),将内容物放入其中。
2.将0.25 ml ddH2O(装在透明微管中)加入20 x FAO基质小瓶和涡流管中溶解。重构的20倍FAO基质溶液应在-70℃下储存。
对照溶液和反应溶液的制备:
将1份dH2O和19份FAO含量测定溶液混合制备对照溶液,例如将25µl dH2O与475μl FAO含量检测溶液混合。将溶液放在冰上。将1份20x FAO基质和19份FAOAssay溶液混合制备反应溶液,例如将25μl 20x粮农组织基质与475μl粮农组织测定溶液混合。将溶液放在冰上并立即使用。
从正常仓鼠心脏(F1B菌株)和衰竭心脏(TO2菌株)制备组织匀浆。FAO检测试剂盒检测了FAO的活性,表明衰竭的仓鼠心脏的脂肪酸氧化能力降低。
https://www.amyjet.com/products/BR00001.shtml