微管结合蛋白 Spin Down 检测试剂盒解决方案

该测定允许鉴定将在体外与微管（MTs）结合的蛋白质。该测定依赖于这样一个事实，即MT在以100,000 x g 离心时会沉淀。因此，与MT相关的任何蛋白质都会在离心过程中沉淀。对上清液与沉淀级分进行简单的SDS-PAGE分析将确定蛋白质是否能够与MTs相关联。本手册中给出的测定描述适用于重组表达的“测试”蛋白，但是，该测定可以适用于细胞裂解物或体外翻译产物。

应该注意的是，应获得MT关联的体内确认，以确认该蛋白质可以归类为MAP。这种关联不需要在整个细胞周期中发生，甚至可以在发育上受到调节，事实上，MAP与微管的短暂关联是常态而不是例外。

艾美捷微管结合蛋白 Spin Down 检测试剂盒 #BK029用途：

确定蛋白质或化合物是否与微管结合。

测试各种缺失突变体仍然结合微管的能力，然后计算它们对微管的亲和力，从而鉴定微管结合位点。

在ATP（驱动蛋白）或GTP（动力蛋白）的不可水解类似物存在下，从细胞中提取这些或在突变时显示其结合亲和力。

微管结合蛋白 Spin Down 检测试剂盒内容：

该试剂盒包含足够的材料，可根据检测量进行 30-100 次检测。包括以下试剂：

微管蛋白， >99% 纯度， （# T240）

微管相关蛋白级分（阳性对照）（# MAPF）

牛血清白蛋白（BSA）蛋白（阴性对照）

一般微管蛋白缓冲液（# BST01）

微管蛋白甘油缓冲液（# BST05）

GTP （# BST06）

微管重悬缓冲液

紫杉醇（# TXD01）

二甲基亚胺

盐提取缓冲液

包含详细协议和广泛故障排除指南的手册

微管结合蛋白 Spin Down 检测试剂盒示例结果：

通过将MT与微管相关蛋白级分（Cat.#MAPF）或BSA相结合来测试微管结合旋下测定。正如预期的那样，MAPF与微管共沉积，而BSA则不（图1）

图：使用 BK029 的 MAP 旋速测定。将微管与缓冲液（MT），MAP蛋白（MT + MAPF）或BSA（MT + BSA）混合，并通过100,000×g离心沉淀MTs.通过SDS-PAGE检查上清液（S）和沉淀（P）级分。MAP蛋白，但不是BSA，与MT结合并共沉淀。MAP（MAPF）或BSA（BSA）蛋白单独不能沉淀。

https://www.amyjet.com/products/BK029.shtml