脂肪酸氧化FAO检测试剂盒的特点和保存建议

脂肪酸氧化FAO检测试剂盒以多个单独的成分（装在6个小瓶中）装运，以确保试剂在没有干冰的情况下至少一周的完整性。重建前，将试剂盒储存在4℃。请按照以下说明重新配制FAO分析溶液和20倍FAO基质溶液。

重构脂肪酸氧化FAO测定溶液（5 ml）：

1.在室温下解冻试剂1（在棕色微管中0.5毫升）。将FAO含量测定溶液（5毫升装在绿盖小瓶中）置于冰上。

2.将试剂1溶液转移到FAO分析溶液中，并立即混合溶液以防止试剂沉淀。将混合溶液放在冰上遮光。

3.轻敲试剂2小瓶（透明微管）以将内容物沉积在里面。将试剂2的内容物转移到FAO分析溶液中，并通过轻轻搅拌溶解内容物（如有必要，用一些FAO分析液冲洗干净的小瓶，以确保完全转移）。在遮光的冰上轻轻搅拌FAOAssay溶液约5分钟。重构的FAO含量测定溶液应储存在-70℃下。

重组20倍脂肪酸氧化FAO基质（0.25毫升）：

1.轻敲20 x FAO基质小瓶（透明微管），将内容物放入其中。

2.添加0.25 ml ddH₂O（在透明微管中）至20x FAO基质小瓶和涡流管以溶解内容物。重构的20倍FAO基质溶液应在-70℃下储存。

脂肪酸氧化（FAO）检测试剂盒（目录号BR00001）组件：

FAO含量测定溶液-5 ml（用于100个孔），储存在-70°C（在测定过程中遮光溶液）

20倍FAO基质（20倍辛酰基辅酶A）-0.25毫升，储存于70℃

10倍细胞裂解液-25 ml，在4C下储存（含1%TX-100；稀释前快速旋转瓶）

脂肪酸β-氧化活性测定基于辛酰基CoA的氧化，其与NADH依赖性的INT还原为INT甲zan有关。甲zan产物在492nm处表现出最大吸收（消光系数=18mm-1cm-1），允许灵敏地测量细胞/组织提取物中存在的FAO活性。请注意，FAO的活性受所用细胞/组织的线粒体含量的影响。如果储存和处理得当，套件组件至少可以稳定一年。

细胞/组织提取物的制备：

1.通过用冰冷的dH2O稀释10x细胞裂解溶液来制备1x细胞裂解溶液。Bringup在50-100μl冰冷的1x细胞裂解液中用吸管轻轻冲洗至少105个细胞。将裂解物在冰上搅拌5分钟。如果裂解液过于浑浊，则添加更多的1x细胞裂解液并重复移液。将组织在冰冷的1x细胞裂解溶液（10-20mg组织在0.5ml中）中匀浆。

2.将裂解物在冷的微型离心机中以约14000 rpm离心5分钟。上清液在-80℃下保存。

3.使用BCA蛋白测定法测定裂解物蛋白浓度。建议样品蛋白质浓度范围为1-2mg/ml。在测定过程中，始终将裂解物放在冰上。

试剂解冻：

将解冻的粮农组织分析溶液和20倍粮农组织基质置于遮光冰上。不要过度解冻。移液前轻轻搅拌溶液。尽量减少试剂解冻的时间是很重要的。使用后立即冷冻溶液。

图：从正常仓鼠心脏（F1B品系）和衰竭仓鼠心脏制备组织匀浆心脏（TO2应变）。粮农组织的检测试剂盒对粮农组织的活动进行了检测，结果表明仓鼠心脏的脂肪酸氧化能力降低。

研究领域：

对健康和病理状态下的代谢途径和过程进行研究（脂质代谢）。 研究信号转导途径； 研究遗传性疾病，例如脂肪酸氧化障碍（FAODs）； 研究心血管疾病，例如心力衰竭； 研究胎儿发育期间的细胞能量代谢； 研究脂肪酸氧化在癌症代谢中的意义。

https://www.amyjet.com/products/BR00001.shtml