T7 RNA聚合酶的两种类型和适用范围
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下一篇 2023-09-27 16:01:12/ 个人分类:生化试剂
T7 RNA 聚合酶是一种依赖 DNA 的 RNA 聚合酶,其对噬菌体 T7 启动子序列有高特异性。该酶从 T7 启动子插入到转录载体下游的 DNA 上合成大量 RNA。可获取 T7 RNA 聚合酶技术公告。
应用:标记和未标记的 RNA 转录本的合成。
来源:从在质粒上表达 T7 RNA 聚合酶基因的大肠杆菌纯化获得。
性能和质量检验:3´ 和 5´ 脱氧核糖核酸外切酶、核糖核酸酶和 DNA 缺口检测;
转录反应中的性能。
T7 RNA聚合酶类型:
常规型和耐热型。常规型T7 RNA聚合酶可在37℃对模板进行高效体外转录,而耐热型T7 RNA聚合酶可在更高的温度下进行体外转录。基于此耐热的体外转录反应特性具有以下优势:
1.提升了GC含量较高RNA的转录效率;
2.提升了长片段RNA的合成能力;
3.在使用帽类似物时,提高了共转录的加帽效率;
4.减少了dsRNA 副产物的形成,降低了合成RNA的免疫原性。
艾美捷T7 RNA聚合酶:
英文名字:T7 RNA Polymerase
货号:C-BSM0124
规格:5000 U / 25000 U
组成:T7 RNA Polymerase (50 U/μl)/10×T7 RNA Polymerase Buffer
纯度:SDS-PAGE检测结果大于95%。
核内残留物:将20 U T7 RNA聚合酶与超螺旋质粒DNA在37°C下孵育4小时,DNA电泳未检测到质粒的变化
残留DNA酶:将T7 RNA聚合酶与双链DNA在37°C下孵育16小时,DNA电泳未检测到DNA变化。
RNase残基:将T7 RNA聚合酶与RNA在37°C下孵育1小时,电泳中未检测到RNA降解
T7 RNA聚合酶适用范围:
1. 合成单链 RNA,包括 mRNA,siRNA,gRNA 等各类 RNA 的前体。
2. 合成标记或未标记的高特异性 RNA 探针。
3. 利用帽子类似物合成加帽的 mRNA。
推荐的反应条件:
在37°C下培养1小时。如果转录物长度小于300nt,反应时间可以延长至2-16小时。反应结束后,在上述20μl反应混合物中加入1μl双脱氧核糖核酸酶,并在37°C下孵育15分钟以移动DNA模板
https://www.amyjet.com/products/C-BSM0124-5000U.shtml
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TAG: rna聚合酶t7