高灵敏度EZElisa游离三碘甲状腺原氨酸(fT3) ELISA试剂盒

在正常的甲状腺功能中，随着载体蛋白浓度的变化，总三碘甲状腺原氨酸（T3）水平也会发生变化，以使游离T3浓度保持不变。因此，游离T3浓度的测量与临床状况的相关性更可靠，而不是总T3水平。妊娠、口服避孕药和雌激素治疗导致总T3水平升高，而游离T3浓度基本保持不变。EZElisa™游离三碘甲状腺原氨酸（fT3）ELISA试剂盒采用竞争性抑制酶免疫测定技术。试剂盒中的微孔板已经预包被了特异性抗fT3抗体。将标准品或样品与生物素偶联的fT3加入适当的微孔板孔中。fT3（标准品或样品）与预包被的特异性抗fT3抗体结合的生物素偶联的fT3之间发生竞争性抑制反应。样品中fT3的含量越多，与生物素偶联的fT3结合的抗体越少。洗涤后，加入Avidin-HRP到孔中。然后加入底物溶液，颜色的发展与样品中fT3的含量相反。停止颜色的发展，并测量颜色的强度。

艾美捷EZElisa游离三碘甲状腺原氨酸(fT3) ELISA试剂盒基本参数：

目录号：D-AEK0004

规格：48T/96T

储存：在4°C下储存12个月，避光。

检测范围：2 pmol/L-32 pmol/L

灵敏度：2 pmol/L

特异性：EZElisa™游离三碘甲状腺原氨酸（fT3）ELISA试剂盒对fT3的检测具有高灵敏度和良好的特异性。未观察到fT3与类似物之间的显著交叉反应或干扰。

适用样本：血清、血浆

供应材料和储存条件：

Note: Std1: 2 pmol/L; Std2: 4 pmol/L; Std3: 8 pmol/L; Std4: 16 pmol/L; Std5: 32 pmol/L.

EZElisa游离三碘甲状腺原氨酸(fT3) ELISA试剂盒试剂准备：

注意：在使用前，将所有试剂平衡至室温。如果缓冲液浓缩物中出现结晶，请轻轻加热它们直到完全溶解。1×洗涤缓冲液：将洗涤缓冲液（20×）用去离子水稀释1:20，得到1×洗涤缓冲液。储存在4°C。

样本制备：

1. 血清：使用血清分离管，在室温下凝固样品30分钟，然后离心15分钟，速度为1,000 g。立即使用血清进行检测，或将样品分装并储存在-20°C。避免反复冻融循环。

2. 血浆：使用EDTA、肝素或柠檬酸盐作为抗凝剂采集血浆。在采集后30分钟内，以1,000 g的速度离心15分钟。立即检测，或将样品分装并储存在-20°C。避免反复冻融循环。

注意：不要使用明显溶血或脂质混浊的样本。如果样品在24小时内使用，可以储存在2到8°C。避免反复冻融循环。在进行检测之前，应缓慢将冷冻样品恢复至室温，并轻轻混匀。

程序分析：

1. 从板架上取下多余的微孔板条，将它们放回带有干燥剂包装袋的铝箔袋中，并重新密封。

2. 每个孔加入50μL的fT3标准品或样品。建议将所有标准品和样品都复制加入到微孔板中。设置一个空白孔，不加入任何溶液。

3. 向每个孔中加入50μL的生物素偶联的fT3（空白孔除外）。充分混匀，用提供的孔盖盖好，然后在37°C下孵育1小时。

4. 倒掉每个孔中的液体并进行洗涤，总共洗涤三次。使用多通道移液器或自动微孔板洗涤器，用1×洗涤缓冲液（250μL）充满每个孔，静置10秒钟，每个步骤中完全去除液体对于良好的性能至关重要。在最后一次洗涤后，倒掉任何剩余的1×洗涤缓冲液，将板子倒置并用干净的纸巾轻轻擦干。

5. 向每个孔中加入50μL的亲和素-HRP（空白孔除外），充分混匀，用提供的孔盖盖好。在37°C下孵育30分钟。

6. 重复第4步的洗涤过程。

7. 向每个孔中加入50μL的底物A和50μL的底物B，充分混匀，用提供的孔盖盖好。在37°C下孵育15分钟。将板子放在无风处和其他温度波动的地方，保持黑暗。

8. 向每个孔中加入50μL的停止溶液。停止溶液应按照HRP底物的顺序加入到孔板中。孔中的颜色应从蓝色变为黄色。如果孔中的颜色是绿色，或者颜色变化不均匀，请轻轻敲击板子以确保充分混匀。

9. 在30分钟内使用设置为450 nm的微孔板读数仪测定每个孔的光密度。

该试剂仅用于科学研究领域，不适用于临床诊断或其他用途。

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