游离胆固醇 (FC) 检测试剂盒的样品准备方法

游离胆固醇（Free cholesterol，FC）是细胞膜的主要成分，也是合成肾上腺皮质激素、性激素、胆汁酸和维生素D等生理活性物质的重要原料。组织中的游离胆固醇浓度可作为衡量脂质代谢的指标。EZMeta™ 游离胆固醇（FC）比色法检测试剂盒提供了一种简便的方法，用于检测动物组织、细胞、细菌、血清和血浆等生物样品中的游离胆固醇。其原理是胆固醇氧化酶催化游离胆固醇生成Δ4-胆甾酮和H2O2，过氧化物酶催化H2O2、4-氨基苯酚和酚生成红色醌化合物，其吸收峰位于500 nm，颜色的深浅与游离胆固醇含量成正比。

艾美捷 游离胆固醇 (FC) 检测试剂盒：

货号：D-AKC2210

规格：48T / 96T

储存条件：储存在4°C下，避光，保存12个月

适用样本：血清、血浆、动物组织、细胞、细菌

所需材料但不提供：

·能够测量500 nm吸光度的微孔板读数器或可见光分光光度计

·96孔板或微玻璃比色皿、精密移液器、一次性移液头

·冰制造机、冷藏离心机、水浴

·无水乙醇 ·匀浆机（用于组织样本）

试剂制备：

FC工作溶液：按提供的状态直接使用。使用前平衡至37°C。储存在4°C。 标准品：按提供的状态直接使用。使用前平衡至室温。储存在4°C，避光保存。 制定标准曲线：将2 µmol/mL的标准品用无水乙醇稀释至表格中所示的1、0.5、0.25、0.125、0.063、0.031 µmoL/mL。

游离胆固醇 (FC) 检测试剂盒样品制备：

注意：建议使用新鲜样品。如果不能立即测定，样品可以在-80°C下保存一个月。 1. 动物组织：称取约0.1 g组织，加入1 mL无水乙醇。在冰上匀浆。以8,000 g离心10分钟，4°C。使用上清液进行测定，并放置在冰上进行测试。 2. 细胞或细菌：收集5×10^6个细胞或细菌到离心管中，在离心后弃去上清液；加入1 mL无水乙醇，在冰浴中超声破碎细胞或细菌5分钟（功率20%或200 W，超声3秒，间隔7秒，重复30次）。以8,000 g离心10分钟，4°C。使用上清液进行测定，并放置在冰上进行测试。 3. 血清（血浆）样品：直接进行测试。 注意：如果通过蛋白质浓度计算含量，最好使用EZMeta™ 游离胆固醇（FC）比色法检测试剂盒定量总蛋白质。

游离胆固醇 (FC) 检测试剂盒典型数据：

该试剂仅用于科学研究领域，不适用于临床诊断或其他用途