声波基质微粒喷涂器

声波基质微粒喷涂器
 
Anal Chem. 2006 Feb 1;78(3):827-34.
Automated acoustic matrix deposition for MALDI sample preparation.
Aerni HR, Cornett DS, Caprioli RM.

本文报道了一种用于MALDI-IMS的基质涂喷装置－－声波基质微粒喷涂器（Acoustic Reagent Multispotter，ARM）。该装置还实现了与MALDI-TOF-MS全自动联用。

原理：该喷射器在溶液下方给予一定的射频脉冲，产生声波能量使得溶液振动，基质溶液表面拉伸成锥形结构。当能量刚刚超过一定阈能值时，基质溶液表面的锥形结构将决裂形成一个球形液滴，液滴垂直向上喷射至位于其正上方的组织切片表面。液滴形成的大小，与溶液性质和声波能量相关。图为其该装置结构示意图。
 
液滴平均体积测定：将荧光素溶解在四种乙腈/水配比体系的溶液中，水的比例分别为50，70，90和100%。荧光素浓度3.5mg/ml。将四种溶液分别装入四个储液器中，在一个小片的铝箔上连续喷射2000滴，每份平行操作4次，得到16个箔带。每个箔带在pH 9.0, 9ml,50mmol/L Tris缓冲液中提取1分钟，溶解每个箔带上的荧光素。采用荧光分光光度计进行测定荧光素的量。该检测量与液滴平均体积正相关。结果，在同样的仪器参数条件下，50%乙腈的溶剂体系最佳。

装置优点：
不含毛细管和喷嘴，可避免戳破组织表面。非接触性点喷，不产生交叉污染。
产生单向喷射的液滴（180-200um），提高基质覆盖的重复性，包括样品之间或者不同时间的重复性。
基质溶液可以精确覆盖于某一点，某一感兴趣区域和矩阵方式覆盖整个组织表面。
以不同的喷射频率连续的储存基质，不但有效的提取组织中的蛋白，而且蛋白移位程度也大大降低。
喷射参数根据基质/分析物的比率进行微调。
可以改变雾滴的尺寸，大大提高成像分辨率。

缺点：如果液滴尺寸太小，蛋白共结晶不充分，则不易于质谱均匀采样，难以解吸大蛋白分子。

(翻译：军事医学科学院 许彬，刘念，杨帆)