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色谱柱能否用纯水冲洗?冲洗后会有什么样的影响?
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下一篇 2010-05-14 09:13:38/ 个人分类:液相色谱耗材
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用纯水短时间内冲洗
色谱柱,通常不会对色谱柱造成较大的损伤,但如果长时间用水冲洗色谱柱则
分析测试百科网;dQb^L)Ks;^可能引起固定相流失和相塌陷现象,所以若非必要请尽量避免用纯水冲洗色谱柱,建议在水中加入一定
分析测试百科网s{D?pmv^2U?量的甲醇或乙腈进行冲洗,通常水的含量<90%不会对色谱柱造成任何影响。
uQh1l;G$B,~0原因
分析:
分析测试百科网MQ%ES:`b}0H 首先,由于目前所用的色谱柱大多以硅胶为基质,硅胶的溶解特点是在纯水中的溶解度比在含有一
分析测试百科网&U)l3D"R/k.oX2p定浓度有机溶剂的
流动相中要大得多,所以长时间的用纯水冲洗会导致固定相的流失,引起柱效下降。
分析测试百科网lv#@Kt8A7\z 其次,对于常规的 C18 柱而言,由于C18 长链与水是不互溶的,C18 长链之间的相互作用力大于
\ L7N&fqK8}lw0C18 与水分子的作用力,长时间的用水冲洗,使得C18 长链之间相互靠近,水流的冲刷,导致相互联结
分析测试百科网9eX4a8Zc*\a的C18 长链倒伏在硅胶基质的表面,对疏水性物质的保留能力下降,即相塌陷。针对用纯水冲洗容易出
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U0现相塌陷的现象,有些厂家推出了纯水柱(如我公司的UltimateTM AQ-C18 柱),这种纯水柱可以用纯
分析测试百科网-r~u'YAU2P水作流动相而不会产生相塌陷,这对只溶于纯水的样品的分析提供了一个很好的选择。
d$Us8T.x3e0 第三,如使用过含缓冲盐的流动相的色谱柱,用纯水冲洗,并一定能将缓冲盐完全洗去。因为,由
7^!ls'|{8h%\ N0于缓冲盐难溶于有机溶剂,C18 反相柱中用的填料是在硅胶表面上接上许许多多的C18 长链,相当于一
分析测试百科网'dZ/vs%KsX个疏水的有机相,而硅胶基体被有机物质包裹着,所以用纯缓冲盐水溶液做流动相时也许缓冲盐不容易
-\0Cq(c_u0到达硅胶基质,不至损害基体。但所用的流动相通常会含一部分有机溶剂,而且这些有机溶剂与C18
l+}l2Y(K\0长链是互溶的,因此有机溶剂的加入增强了流动相渗入硅胶基质的能力,能使部分缓冲盐达到硅胶基质。
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