LC-MS/MS快速多目标筛查中毒药物

中毒与中毒检测

中毒是化学物在人体效应部位达到一定剂量而引起损害的疾病，是外来化合物与人体组织相互作用的疾病。研究人类毒物中毒的诊断与救治的科学为临床毒理学（Clinical Toxicology）或医学毒理学（Medical Toxicology），即中毒学。

每年由于各种原因导致成千上万的患者因药物中毒，然而，体内毒物分析面临着诸多难题：

1、药物及其代谢产物体内浓度极低，常规检测手段难以达到检测所需灵敏度，存在检出假阴性的可能。

2、生物基质（血液、尿液、唾液、淋巴液等）成份复杂，可能会干扰检出。

3、代谢产物与原型药物结构相似，造成对检测的干扰，存在检出假阳性的可能。

4、生物检测样体量少，来源困难，中毒时限紧迫，检测需快速、灵敏。

因此，快速、灵敏、专属性强的检测方法是临床急救急需解决的问题。

中毒检测新技术——LC-MS/MS

液相色谱-串联质谱联用技术（LC-MS/MS）集高效液相色谱的高分离性能与质谱的高灵敏度、高专属性的优点于一体，因为其对多数药物结构的通用性、检测的专属性和灵敏度等各方面的优势，已迅速成为临床毒理学研究中采用的主要分析方法。

不要求色谱峰完全分离，根据指定离子对进行相关扫描，通过IDA判断对达到域值的化合物进行二级碎片离子扫描，通过二级碎片图谱进行谱库检索，完成对未知毒物的筛选和确证。选择性高，可同时快速分析数百种化合物，MRM定量，灵敏度和选择性无与伦比，已经在法医毒物鉴定、中毒抢救和残留监测中得到成功应用。

LC-MS/MS快速多目标筛查中毒药物

目前医院使用的常用药物超过上千种，常见容易引起急慢性中毒的药物超过300种，以LC-MS/MS的特性，应该成为承担此任务的首选。我院中毒急救中心在软硬件完备的情况下，在北京首家开展LC-MS/MS快速多目标筛查中毒药物，现已建立了1200种化合物的质谱库，其中包含大于300种常见药物的质谱库，结合仪器自动信息相关扫描及谱图查询的功能，可轻松找寻中毒患者样品中的异常物，协助监测中毒患者的病因。现已成功筛查中毒急救样品百余次，为中毒患者的临床抢救提供了重要依据，大大提高了抢救的成功率。

LC-MS/MS快速多目标筛查中毒药物检出情况：

我院中毒急救中心现已成功筛查中毒急救样品百余次，检出替马西泮、奥沙西泮、普拉西泮、安定、艾司唑仑、阿普唑仑、劳拉西泮、去氧西泮（代谢物）、扑热息痛、咖啡因、扑尔敏、氨基比林、安替比林、吡罗昔康、氨苯蝶啶、麻黄碱、左匹克隆、米尔塔扎平、丁卡因、喹硫平、尼古丁、西酚普兰、卡布特罗(脲喘宁)、苯海拉明、纳洛酮、金刚烷胺等共计60多种。

检出药物分类如下：

镇静催眠药	艾司唑仑、阿普唑仑、安定、替马西泮、奥沙西泮、普拉西泮、劳拉西泮、去氧西泮（代谢物）、左匹克隆
解热镇痛药	扑热息痛、氨基比林、安替比林
中枢兴奋药	咖啡因、尼古丁；
抗过敏药	扑尔敏
利尿药	氨苯蝶啶
抗抑郁药	米尔塔扎平、喹硫平
麻醉药	丁卡因
止吐药（H1受体阻断药）	苯海拉明
吗啡解毒药	纳络酮
平喘药	麻黄碱、卡布特罗（脲喘宁）
抗帕金森药	金刚烷胺

LC-MS/MS快速多目标筛查中毒药物典型病例

病例1：家属反映服安定自杀，在其它医院抢救，效果不佳，慕名来我院检测血样，结果患者体内含有大量的卡马西平，该结果及时地指导了临床抢救，患者转危为安。

病例2：入院呈昏迷状态，怀疑药物中毒，检测结果为对乙酰氨基酚，且血药浓度为3.36 μg/ml（服药后30小时），为肝中毒的信息表达，因此怀疑为患者长期大量饮酒引起慢性肝酒精中毒，导致服用对乙酰氨基酚后出现中毒反应，临床诊断为爆发性肝衰竭。

病例3：患者自述服用大量安定7小时，经300种毒物库中筛查，检测结果为安定（19.6 μg/ml），及其代谢产物替马西泮（Temazepam）、奥沙西泮（oxazepam）和普拉西泮（prazepam），响应值较高。

病例4：怀疑被投毒陷害，经检测未发现任何异常，依据科学的检测结果进行耐心的说服，使患者消除了长期的精神困扰。

LC-MS/MS快速多目标筛查中毒药物毒物库分类目录

我院中毒急救中心开展LC-MS/MS快速多目标筛查中毒药物，现已建立了1200种化合物的质谱库，其中包含大于300种常见药物的质谱库（见下表）：

LC-MS/MS快速多目标筛查中毒药物毒物库分类目录

未来的目标：

• 扩展急慢性中毒药物数据库及其LC-MS/MS定性和定量的检测方法，完成其它多种常见急慢性中毒的数据库并建立相应的LC-MS/MS检测方法；
• 扩大检测的库容量（增至600多个药物），完成400个急性中毒药物的LC-MS/MS检测数据库的优化，拓展中毒药物的检测工作；

第二炮兵总医院中毒急救中心

第二炮兵总医院中毒急救中心于2006年4月底成立，中心配备有美国AB公司3200Qtrap型质谱仪（280万元）；美国安捷伦公司1100型高效液相色谱仪（45万元）；日本岛津公司SIL-20A高效液相色谱仪（30.7万元）；日本岛津公司SPD10A液相色谱仪（25万元）；美国雅培TDX型血药浓度检测仪（27.5万元）；国产CP225D电子天平（2万元）；德国5451D高速离心机（1.85万元）等400多万的大型现代分析仪器设备，拥有300多种药物毒物库，能对相应药物和农药残留物进行定性分析，可以承担中毒和突发事故中部分未知毒物的快速筛查，为临床中毒病例的诊断提供了重要依据。

工作基础：

• 300多种药物的数据库；
• 快速简便的样本前处理方法；
• 已完成156例次的检测。

多方位协作和技术支持：

• 中毒急救中心与门诊急诊、呼吸科、神经内科、儿科等临床科室长期合作，共同完成多例急慢性中毒急救工作，有丰富的协作经验，能够快速、顺利开展急救工作。
• 中毒急救中心与北京市多家大型医院急诊合作，建立了良好的合作关系。及时、保质、保量的完成了多家医院急诊中遇到的诊断难题。
• 中毒急救工作得到美国应用生物系统公司（AB公司）鼎立支持，其在液相色谱质谱仪等方面的专业技术支持对中毒急救工作的开展起到关键作用。

[1] 沈敏, 向平等. LC-MS/MS多反应监测筛选分析血液中132种毒药物. 中国司法鉴定, 2006, 01.
[2] C.A. Mueller，W. Weinmann, et al. Development of a multi-target screening analysis for 301 drugs using a Q-Trap liquid chromatography/tandem mass spectrometry system and automated library searching. Mass Spectrom. 2005: 19.