溶栓胶囊红外光谱法的鉴别研究

摘要：本文采用红外光谱法及二阶导数谱对不同批次的溶栓胶囊(Plasmin capsules)进行无损快速鉴别研究。实验研究表明，不同批次的溶栓胶囊其蛋白(酶)的成分都和原料有不同程度差别，并且加入的辅料的量也有较明显的不同。辅料的添加量直接影响溶栓胶囊的生物活性。最后对各个批次的溶栓胶囊做重复性实验，发现红外谱图有一定的波动，说明药品的均匀性较差。

据《本草纲目》记载，经现代中医理论证实，地龙(蚯蚓)性味咸寒，不但能通经络，活血化瘀，又能平肝泻火，故对瘀血阻于经络者多奇效。该溶栓胶囊是从北京东郊蚯蚓养殖场培殖的正蚓科双胸蚓属(Lumbficidae Bimastos)赤子爱胜蚓(Eisenia foetida)中采用高科技提取出的蛋白水解酶，属纯中药多分酶制剂。主要成分为3种溶解血栓的酶，即纤溶蛋白溶解酶、纤溶酶原激活物和胶原酶，具有抑制血小板粘附作用，既能溶解已形成的血栓，又能抑制血管内新血栓的形成，适用于中风、半身不遂、肢体麻木、高血压症等心血管疾病。据临床发现，该药物的药效不是很稳定。因此，对该溶栓胶囊进行质控研究具有很大的现实意义。

傅立叶变换红外光谱法(FTIR)是一种普遍且常用的分析方法，由于具有宏观整体鉴定复杂体系的优点以及无损快速的特点，越来越广泛的用于药用动、植物的真伪优劣鉴别研究领域。孙素琴等人在该领域已进行系统化的质控研究。

二阶导数谱能够提高谱图的表现分辨率，能把复杂体系中原来重叠的波峰区分开，增大红外谱图的分辨率 。本文采用红外光谱与二阶导数谱的结合对溶栓胶囊进行无损快速鉴别研究。

1 实验

1.1 仪器条件

实验仪器为Perkin Elmer公司Spectrum GX傅立叶变换红外光谱仪，DTGS检测器，分辨率为4/cm，扫描次数累加16次。

1.2 样品来源

4个批次的中远威药业生产的溶栓胶囊与溶栓原料由首都医科大学提供。批号为2OOO.1，2001.1，2002.1，2003.1。地龙是由北京东郊蚯蚓养殖场提供正蚓科双胸蚓属赤子爱胜蚓。

2 结果与讨论

2.1 溶栓原料与地龙的红外光谱比较

溶栓原料的165l/cm、1549/cm、1451/cm、1405/cm、1238/cm 吸收峰和地龙的1655/cm、1545/cm、1452/cm、1398/cm、1236/cm吸收峰分别相差4、4、1、7和2个波数。由于溶栓原料从地龙提取而来，可知溶栓原料的蛋白(酶)丰度增加，尤其是含有伯酰氨基团的蛋白(1405/cm对应伯酰氨的酰氨Ⅲ带的吸收峰。)有很明显的增加，并且添加了少量的Si02辅料(1079/cm这个宽而钝的峰强有所增加)。

可以看出1727/cm、1551/cm、1468/cm、1412/cm附近的基团振动峰都有明显的增强，1658/cm、1546/cm对应基团吸收强度的相对变化说明溶栓原料的蛋白含量有明显的增加，所含成分也有所变化。出现该结果是因为前面提到的制备溶栓原料时对地龙的蛋白有选择提取的缘故。

2.2 不同批次溶栓胶囊的红外光谱比较

不同批次的溶栓胶囊主要的差别在于酰氨I带、Ⅱ带对应的1651～1641/cm、1549～1545/cm吸收峰与1155/cm、1084/cm、1055/cm附近淀粉等的特征吸收峰的相对强度不一样。由于蛋白(酶)是溶栓胶囊的主要有效成分，酰氨I、Ⅱ带的峰越强说明有效成分含量越多;反之，1155/cm、1084/cm、1055/cm附近淀粉等的特征吸收峰带越强且酰氨I、Ⅱ带的出峰位置越偏向低波数，有效成分含量则相对越低。各个批次加入的辅料量(包括：淀粉、SiO2等)大小次序为：2000.1>2001.1>2002.1>2003.1。并可进一步看出，2000.1与2003.1的SiO2辅料含量相对较多，2001.1与2OO2.1的淀粉含量相对较多。此外，2003.1的溶栓胶囊的蛋白峰特别是酰氨I、Ⅱ带的峰和溶栓原料符合的非常好，虽然添加一定量的辅料但是可以断定其疗效应该和原药疗效最为接近。

2.3 重复性实验

同时对各个批次的溶栓胶囊做重复性实验，实验发现各个批次的溶栓胶囊均有一定的不均匀性。2000.1批次的重复性实验红外谱图，进行选点归一化处理(选取1084cm 处对应的点)，可看出测的谱各吸收峰强度具有一定的波动性，说明目前利用SiO2崩解剂等溶栓胶囊制备技术依然无法完全解决溶栓胶囊成分混合均匀难的问题。

3 结论

综上所述：不同批次溶栓胶囊质量的优劣可通过酰氨I、Ⅱ带和l155/cm、1084/cm、1055/cm附近淀粉等特征吸收峰的相对强度判断;四个批次的辅料含量顺序为：2000.1>2001.1>2002.1>2003.1。首都医科大学张祖询等人的生物活性实验也给出相同的顺序，进一步说明辅料添加的多少直接影响药物的疗效。红外光谱法及二阶导数谱的结合分析方法无损快速准确，对不同批次的溶栓胶囊的区别鉴定获得较为满意的分析结果。

参考文献

1 谢晶曦.常俊标.王绪明编著.红外光谱在有机化学和药物化学中的应用(修订版)，北京：科学出版社，2001

2 冯玲玲、马全保.溶栓胶囊的研制及临床应用，中草药，1997.9：552～553

3 李新毅、魏丽华.溶栓胶囊治疗中风病100例疗效总结，中医药研究，1998，6：26～27