wako 295-50201 生物制药残余DNA抽提试剂盒

9O`&h)_$RsB eE0上海惠诚生物科技有限公司 “惠质产品，挚诚服务”。
特色产品：糖类标准品，脂肪酸标准品，花青素标准品，类胡萝卜素等食品分析标准品
联系人吕海秀，021-60498804，13917250134。

惠诚生物特色产品：糖类标准品，脂肪酸标准品，花青素标准品，类胡萝卜素标准品等食品分析标准品

原理

 

　 　在工业生产的疫苗和治疗用生物制品（干扰素、白细胞介素、单克隆抗体、重组蛋白）中，宿主细胞残余DNA 污染直接影响最终产品和整个生产过程的质量和产量，可能引起动物致瘤、感染病毒DNA 等严重后果， 中国药典、WHO、EU、FDA对宿主细胞DNA 残留限量都有规定。传统的DNA 提取方法蛋白酶K-SDS 法在SDS的稳定和促进下降解细胞中的蛋白质特别是核酶，再经有机溶剂萃取得到高质量的DNA，但有提取时间较长和使用有毒溶剂氯仿和苯酚等缺点。该产品 是血清中病毒DNA 和生物制品宿主细胞残余DNA 的提取试剂盒。使用新型提取步骤，用碘化钠（NaI）作为促溶剂，稳定且灵敏度高、时间短，无有毒溶剂，无需复杂和费力操作，即可从样品中得到高质量和高 回收率的DNA。

吕海秀 手机：13917250134  QQ：1715451510

 

◆特点

 

● 可与Threshold 系统配合使用进行DNA 定量分析

● 高灵敏度，可提取低至10 pg 的DNA

● 单独的离心管无交叉污染，提取的DNA可用于下游实验

● 可获得高质量高回收率的DNA

 

 

试剂盒组成

 

试剂盒组成（50 次反应）：

1. 碘化钠溶液 1 x 26 ml

2. 月桂酰肌氨酸钠溶液 1 x 1.2 ml

3. 洗涤液 (A) 1 x 42 ml

4. 洗涤液 (B) 2 x 40 ml

5. 糖原溶液 1 x 0.1 ml

 

 

Wako DNA 提取试剂盒产品选择

 

样品	全血	血清	血浆	组织	石蜡包埋 组织切片	生物制药	培养细胞	头发、指甲 血迹、唾液
	•   DNA Extractor® WB Kit				•   DNA Isolator PS Kit
基因组 DNA	•   DNA Extractor® WB-Rapid   Kit			•   DNA Extractor® WB Kit	•   DNA Isolator PS-Rapid   Reagent		•   DNA Extractor® WB Kit	•   DNA Extractor® FM Kit
线粒体 DNA (mtDNA)	•   mtDNA Extractor® WB Kit			•   mtDNA Extractor® CT Kit			•   mtDNA Extractor® CT Kit
游离 DNA		•   DNA Extractor® SP Kit	•   DNA Extractor® SP Kit
低氧化程度的 DNA	•   DNA Extractor® WB Kit			•   DNA Extractor® TIS Kit			•   DNA Extractor® TIS Kit
细菌基因组 DNA		•   DNA Extractor® Kit				•   DNA Extractor® Kit

  

 

 ◆案例・应用

 

生物制药中DNA残留检测——DNA Extractor^®Kit

 

 

　　宿主细胞DNA(Host Cell Proteins) 对 于具有商业规模的生物药品中，治疗性蛋白药物在细胞培养中的表达是一种比较便宜有效的方法。但是这些产品在生产和纯化过程中，很容易引起宿主细胞DNA残 余污染。尽管残余宿主细胞DNA对治疗性蛋白药物的影响在很大程度上还是未知的，但是也有研究表明宿主细胞DNA可能包含一些有害的DNA片段，使其具有 传染性和致瘤性。因此，在生物制药中，对宿主细胞DNA的检测是非常有必要的。 分析测试百科网:r~2X!`P
Wako（日本和光纯药）对于生物制药中的宿主细胞DNA残留，可提供以下试剂： 分析测试百科网(b"j+`&j+uFA`8`2^
DNA Extractor® Kit

295-50201 50 tests 

 

特点 

 

可与Threshold系统配合使用进行
KZ+N O;x?%d6W0 能用于生物制药、血清中的DNA提取分析测试百科网.GbiTT `f
单独的离心管无交叉污染，提取的核酸可应用于下游实验 分析测试百科网wlR8]'B nk+w h4w!J
可获得高质量高回收率的DNA分析测试百科网@w2oA&]_@p
使用的方法为碘化钠法（Sodium Iodide Method），比传统的方法更为环保
K"M1O:K]!qW0 高灵敏度，可提取低至 10 pg 的 DNA

 

 

◆DNA Extractor^® Kit 实验方案

 

方案1：血清中DNA 提取操作步骤

 

试剂准备：

1） DNA 提取之前，试剂提取如下：

26 ml 碘化钠溶液加入 6 ml 蒸馏去离子水稀释，

再加入 1 ml 月桂酰肌氨酸钠和 65 μl 糖原溶液并混合均匀。 

2） 向洗涤溶液（B）加入 2 μl 糖原溶液并立即混合均匀。

 

 

注意事项：

1）用于稀释 Nal 溶液的蒸馏去离子水须去除 DNA。

2）配制好的洗涤溶液（B）在 4℃至少能保存一周。如果需要少量的洗涤溶液（B），加入糖原 溶液到无菌离心管中至

　  合适体积即可。

3）在保存期间 Nal 溶液会结晶，加热溶液至 50℃可帮助溶解。 DNA 提取步骤：

1）吸取 100 μl 的血清样品加入 1.5 ml 微量离心管；

2）再加入 300 μl 配制好的 Nal 溶液至离心管并混合均匀；

3）将离心管在 60℃恒温容器中加热 15 分钟；

4）取出离心管，加入 400 μl 异丙醇至离心管并混合均匀；

5）离心管在室温静置 15 分钟后离心 10,000 g 15 分钟；

6）尽可能多地吸取上清液，将离心管倒置在纸面上除去残留溶液；

7）加入 1 ml 配制好的洗涤溶液（B）重悬浮得到的白色沉淀，并使白色沉淀从离心管壁上弹开；

8）短暂离心 10,000 g 5 min，去除上清液，将剩余沉淀真空干燥，用于后续的 DNA 分析。

 

 

方案 2: Threshold* 系统 DNA 定量法的预处理

 

试剂预处理 :

1） 将 65 μl 糖原溶液加入 26 ml 碘化钠溶液；

2） 将 2 μl 糖原溶液加入 40 ml 洗涤溶液（B），立即混合均匀。

 

注意事项：

1） 用于稀释碘化钠溶液的蒸馏去离子水须去除 DNA。

2） 配制好的洗涤溶液（B）在 4℃至少能保存一周。如果需要少量的洗涤溶液（B），加入糖原溶液到无

　   菌离心管中至合适体积即可。

3） 在保存期间碘化钠溶液会结晶，加热溶液至 50℃可帮助溶解。

4） 提取步骤应在 DNA 变性之前，因此重要的是使用无菌技术尽可能降低 DNA 污染。预先包装好的无

　    菌吸管、无菌试管和手套都要经过此步骤。

 

DNA 提取步骤：

1） 吸取 400 μl 或 500 μl 的样品加入 2 ml 无菌带盖微量离心管并混合均匀；

2） 吸取 20 μl 的月桂酰肌氨酸钠溶液加入微量离心管并混合均匀；

3） 再加入 500 μl 包含糖原的碘化钠溶液至混合溶液，涡旋后在 40℃保温 15 分钟；

4） 加入 900 μl 异丙醇至混合溶液，涡旋后静置于室温 15 分钟；

5） 短暂离心 10,000 g 15 min 后，能看见管壁有白色沉淀，吸取上清液后将离心管倒置于纸面去

 

吕海秀 手机：13917250134  QQ：1715451510

 

　   除残留溶液；

6） 加入 800 μl 洗涤溶液（A）至离心管，剧烈涡旋使白色沉淀从离心管壁上弹开；

7） 短暂离心 10,000 g 5 min 后，去除残留溶液；

8） 加入 1500 μl 包含糖原的洗涤溶液（B）至离心管并涡旋，短暂离心 10,000 g 5 min 后吸取上清液，

　   剩余的白色沉淀包括 DNA 和糖原载体；

9） 加入分析用缓冲液 (Zero Calibrator buffer) 使白色沉淀溶解，用于后续的 DNA 分析。

 

注意事项：

请于各步骤使用搅拌器将溶液搅拌均匀。样品溶液里含有 DNA 酶时，进行步骤 2 之前请先进 行步骤 3。步骤 4 里样品溶解不完全时，请把保温温度升至 40 - 60℃帮助溶解。但是含有部分蛋白（γ- 球蛋白）或高浓度蛋白的样品（＞ 50 mg/ml），加热可能会导致蛋白聚集，请注意。

* 为 Molecμlar Devices 公司注册商标，是使用生物传感器的高灵敏度分析装置。

 

 

参考文献

1. Ishizawa, M., Kobayashi, Y., Miyamura, T.    and Matuura,: Simple Procedure of DNA isolation from human seru

Nucleic Acids Res., 19, 5792 (1991)

 

 

 

 

其他相关产品：

【产品名称】DNA Extractor? Kit

Wako 295-50201 DNA Extractor? Kit    和光纯药 现货

【制造商】wako

【销售商代码】295-50201

【规格】50Tests

【价格】咨询客服  021-60498804

【保存条件】Keep at RT.

Wako 295-50201 DNA Extractor? Kit    和光纯药 现货

【注意事项】This product is for research use only. Do not administer it to human.

【参考文献】Molecular Biology-DNA Extraction Kits. Detects and quantitates contaminant DNA in serum and residual DNA in biopharmaceuticals. Employs a new extraction procedure for DNA purification from a single tube. This procedure, using Sodium Iodide (NaI) as a chaotropic agent, realizes DNA isolation of both high quality and high recovery from biological fluids without the use of phenol or chloroform. Complex and laborious manipulations are avoided when using Wako 295-50201 DNA Extractor? Kit    和光纯药 现货

this kit. In addition, this kit has a modified application for use with Molecular Devices' Threshold(TM) System. PRINCIPLE of DNA EXTRACTION: A high concentration of chaotropic reagent, NaI, and an anionic detergent participate in solubilization of the proteins and lipids contained in biological samples. After addition of isopropanol to the mixture, nucleic acids are co-precipitated with polysaccharide glycogen as a carrier, while other components remain soluble in the solution phase. Ref.: Ishizawa, M., Kobayashi, T. and Matsuura, S., ''Simple procedure of DNA Isolation from Human Serum'', Nucleic Acids Res., 19, 5792 (1991).

Wako 295-50201 DNA Extractor? Kit    和光纯药 现货

上海惠诚_生物常年提供以下产品 现货或准现货！订购热线： 021-60498804

货号   品名     规格  Cas

012-01965   Alminium Oxide   500g     -

012-03305   Ammonium Dihydrogenphosphate  500g     7722-76-1

012-08643   Amino Acids Mixture Standard Solution, Type B 1mL×5A -

013-08391   Amino Acids Mixture Standard Solution, Type H 5mL      -

Wako 295-50201 DNA Extractor? Kit    和光纯药 现货

015-14461   Amino Acids Mixture Standard Solution, Type AN-2  5mL      -

015-25191   Anti Phosphorylated α-Synuclein, Monoclonal Antibody (pSyn#64)      50ul      -

011-14463   Amino Acids Mixture Standard Solution, Type AN-2  1mL×5A -

011-19365   2,2'-Azobis[2-(2-imidazolin-2-yl)propane]

Dihydrochloride   500g     27776-21-2

016-08641   Amino Acids Mixture Standard Solution, Type B 5mL      -

016-20001   Anti Iba1, Rabbit (for Western Blotting)     50μg     -

016-23281   Anti Rat P2X4, Monoclonal Antibody     50ug     -

017-19362   2,2'-Azobis[2-(2-imidazolin-2-yl)propane] Dihydrochloride    25g 27776-21-2

018-08721   Agar, Powder     100g     9002-18-0

Wako 295-50201 DNA Extractor? Kit    和光纯药 现货

018-22021   Anti Mouse Ago2, Monoclonal Antibody 100μL    -

019-03435   Ammonium sulfate    500g     7783-20-2

019-19741   Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry)    50μg     -

019-22291   Anti Olfactory Marker Protein, Goat      100μL    -

021-02195   Boric acid     500g     10043-35-3

021-16201   BES-H2O2(Cell-impermeant)   1mg      -

031-17601   Collagenase Type I    100mg   9001-12-1

Wako 295-50201 DNA Extractor? Kit    和光纯药 现货

032-08385   Citric Acid Monohydrate   500g     5949-29-1

032-15372   Casein Phosphopeptide    25g -

034-06363   N-Caprylic Acid   25mL    124-07-2

034-16111   Cefotaxime Sodium Salt   1g   64485-93-4

035-04595   Creatinine    500g     60-27-5

035-17604   Collagenase Type I    1g   9001-12-1

038-23221   α-Casein, from Bovine Milk, Dephosphorylated  1mg      -

039-01335   Carboxymethyl Cellulose Sodium Salt   500g     9004-32-4

021-17801   BES-So-AM 1mg      936356-51-3

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022-07985   γ-Butyrolactone  500mL   96-48-0

025-03195   Buffer Solution Standard (Phosphate pH Standard Equimolal Solution)

pH6.86 (25 degrees C)    500mL   -

047-18863   Dexamethasone 100mg   50-02-2

049-18801   4',6-Diamidino-2-phenylindole Dihydrochloride n-Hydrate      10mg      28718-90-3

058-07681   EasySeparator    1set      -

025-03195   Buffer Solution Standard (Phosphate pH Standard Equimolal Solution)

pH6.86 (25 degrees C)    500mL   -

Wako 295-50201 DNA Extractor? Kit    和光纯药 现货

019-08393   Amino Acids Mixture Standard Solution, Type H 5Ax1mL -

019-11941   Active Carbon-impregnated Silica Gel   10g -

019-19741   Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry)    50μg     -

025-15481   BES-Thio     1mg      -

026-16371   BF-170  1mg      -

027-01276   Benzyl Alcohol    500mL   100-51-6

028-03185   Buffer Solution Standard (Phthalate pH Standard Solution)

pH4.01 (25 degrees C)    500mL   -

028-03185   Buffer Solution Standard (Phthalate pH Standard Solution)

Wako 295-50201 DNA Extractor? Kit    和光纯药 现货

pH4.01 (25 degrees C)    500mL   -

028-03205   Buffer Solution Standard (Tetraborate pH Standard Solution)

pH9.18 (25 degrees C)    500mL   -

077-03155   Gelatin   500g     9000-70-8

081-00136   Heparin Sodium  10mu    9041-08-1

088-00705   L-Histidine Hydrochloride Monohydrate      500g     5934-29-2

093-06471   Insulin, Human, recombinant   50mg    -

097-06474   Insulin, Human, recombinant   1g   11061-68-0

120-04891   L-012    100mg   -

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125-05061   Lysyl Endopeptidase, Mass Spectrometry Grade      5x20μg  -

125-05061   Lysyl Endopeptidase, Mass Spectrometry Grade      5x20μg  -

125-05061   Lysyl Endopeptidase, Mass Spectrometry Grade      5x20μg  -

129-02541   Lysyl Endopeptidase( R)   10AU     -

129-02541   Lysyl Endopeptidase( R)   10AU     -

129-02541   Lysyl Endopeptidase( R)   10AU     -

129-04861   LY 294002   5mg      154447-36-6

130-07871   Melibiose     5g   585-99-9

028-16211   BES-So (Cell-impermeant)      1mg      -

028-17811   BES-H2O2-Ac     1mg      -

029-16361   BF-168  1mg      -

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039-23511   CultureSure? Freezing Medium    100ml    -

041-18861   Dexamethasine   1g   50-02-2

042-29445   Dibasic Sodium Phosphate Hydrate 500g     10039-32-4

043-22611   Dextran 200,000 100g     9004-54-0

064-05381   Fibroblast Growth Factor (basic)(FGFb / bFGF / FGF2),

Human, recombinant, Animal-derived-free  50ug     106096-93-9

071-02293   gamma-Globulin, from Human Serum   5g   9007-83-4

075-03075   Gellan Gum  500g     71010-52-1

131-00405   Magnesium Sulfate    500g     10034-, 99-8

136-03032   Methyl Red   25g 493-52-7

137-06085   Molecular Sieves 4A1/16  500g     70955-01-0

138-07872   Melibiose     25g 585-99-9

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145-08221   Nuclease P1 500u     54576-84-0

145-08221   Nuclease P1 500u     54576-84-0

162-09115   Polyethylene Glycol 4,000 500g     25322-68-3

163-03545   Potassium Chloride    500g     7447-40-7

164-21655   N/400 Potassium Polyvinyl Sulfate Solu 500mL   26837-42-3

191-01785   Trisodium Citrate Dihydrate    500g     6132-04-3

193-02041   Glycerol 2-Phosphate Disodium Salt n-Hydrate   100g     819-83-0

195-12854   Streptavidin, from Streptomyces avidinii     5mg      9013-20-1

195-16031   StemSure (R) Freezing Medium     100ml    -

196-00015   Sucrose 500g     57-50-1

196-08675   Sodium Dodecyl Sulfate    500g     151-21-3

Wako 295-50201 DNA Extractor? Kit    和光纯药 现货

197-07485   Sodium Sulfate   500g     7757-82-6

199-02825   Sodium Dihydrogenphosphate Dihydrate    500g     13472-35-0

203-17561   Trichostatin A     1mg      58880-19-6

207-00055   L(+)-Tartaric Acid     500g     87-69-4

208-08385   1mol/l Triethylammonium Hydrogencarbonate Solution   500mL   15715-58-9

223-02112   VA-044  25g 27776-21-2

225-02111   VA-044  100g     27776-21-2

165-09105   Polyethylene Glycol 2,000 500g     25322-68-3

165-17035   Polyvinylpyrrolidone K 30 500g     9003-39-8

167-09045   Polyethylene Glycol 200   500g     25322-68-3

169-04245   Potassium Dihydrogen Phosphate  500g     7778-77-0

169-09125   Polyethylene Glycol 6,000 500g     25322-68-3

Wako 295-50201 DNA Extractor? Kit    和光纯药 现货  021-60498804

185-01003   Rifampicin    5g   13292-46-1

186-01114   all-trans-Retinoic Acid 50mg    302-79-4

189-01001   Rifampicin    1g   13292-46-1

190-05535   Trisodium Citrate Dihydrate    500g     6132-04-3

191-01665   Sodium Chloride  500g     7647-14-5

227-01071   Valproic Acid 5g   99-66-1

231-02011   Wetting Tension Test Mixture No.52.0  50mL    -

232-01941   Wetting Tension Test Mixture No.42.0  50mL    -

233-01971   Wetting Tension Test Mixture No.45.0  50mL    -

234-02001   Wetting Tension Test Mixture No.50.0  50mL    -

235-01931   Wetting Tension Test Mixture No.41.0  50mL    -

Wako 295-50201 DNA Extractor? Kit    和光纯药 现货

235-02031   Wetting Tension Test Mixture No.56.0  50mL    -

236-01961   Wetting Tension Test Mixture No.44.0  50mL    -

238-01921   Wetting Tension Test Mixture No.40.0  50mL    -

238-02021   Wetting Tension Test Mixture No.54.0  50mL    -

238-02141   Wetting Tension Test Mixture No.73.0  50mL    7732-18-5

253-00513   Y-27632 5mg      331752-47-7

257-00511   Y-27632 1mg      331752-47-7

290-34251   Presep-C DNPH   20EA     -

296-63801   LabAssay? Phospholipid   1300tests     -

298-64101   Fructooligosaccharides standard set     set  -

Wako 295-50201 DNA Extractor  Kit    和光纯药 现货

302-93561   Phos-tag (TM) Agarose    0.5mL    -

304-93521   Phos-tag (TM) Acrylamide AAL-107      10mg    -

304-93521   Phos-tag (TM) Acrylamide AAL-107      10mg    -

290-34251   Presep-C DNPH   20EA     -

290-63701   LabAssay? Triglyceride    1000tests     -2016-2-29

290-65901   LabAssay? Creatinine      500tests -

291-58601   Lab Assay ALP    900tests -

293-51601   Endotoxin Extracting Solution for LAL Test  10mL x 4     -

294-62001   DsDD cDNA Subtraction kit Wako   5tests    -

294-63601   LabAssay? NEFA 750tests -

294-65801   LabAssay? Cholesterol    1000tests     -

295-50201   DNA Extractor? Kit   50tests  -

295-51301   Limulus ES-II Single Test Wako     25 tests -

295-51301   Limulus ES-II Single Test Wako     25 tests -

Wako 295-50201 DNA Extractor  Kit    和光纯药 现货

295-73401   Fructooligosaccharides Set      Set  -

304-93526   Phos-tag (TM) Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution   0.3ml    -

305-93551   Phos-tag? Mass Analytical Kit set  -

308-93541   Phos-tag (TM) Biotin BTL-105 10mg    -

308-93563   Phos-tag (TM) Agarose    3mL      -

308-97201   Phos-tag Biotin BTL-1111 1mM Aqueous Solution    0.1000mL    -

325-88521   Lipase PS Amano SD  10g -

298-65701   LabAssay? Glucose   1000tests     -

300-93523   Phos-tag (TM) Acrylamide AAL-107      2mg      -

Wako 295-50201 DNA Extractor Kit    和光纯药 现货

301-93531   Phos-tag (TM) Biotin BTL-104 10mg    -

301-99413   Phos-tagTM Biotin BTL-104 1mM Aqueous Solution[for Campaign]     0.1mL      753451-66-0

302-93522   Phos-tagTM Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution[for Campaign]      0.3mL    871839-54-2

631-00651   Cellmatrix Type I -A (Collagen, Type I, 3 mg/mL, pH 3.0)     20mL    -

637-00653   Cellmatrix Type I -A (Collagen, Type I, 3 mg/mL, pH 3.0)     100mL   -

637-00653   Cellmatrix Type I -A (Collagen, Type I, 3 mg/mL, pH 3.0)     100mL   -

638-01021   Endotoxin Standad /JPSE  10000un      -

986-10001   Anti asialo GM1 (Rabbit), (014-09801)  1mL      617-45-8

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